[桂花树价格]桂花传染病体系的建立
时间：2019/10/10 6:37:06 浏览量：
以桂花杂种B73为研究对象，以桂花病原菌为被试菌株，将桂花叶片的体外感染与桂花的感染进行了比较。厂。究了与POD相关的酶活性和基因表达的相关变化，以及早期桂花叶片的生理和分子指标，并研究了两种接种方法对生理表型和表型的影响。择了桂花的早期生化试剂。较实用和实用的测试方法。果表明，在感染开始时，从体外叶片和感染性植物的入侵系统中选择的各种生理和生化指标的变化没有差异。外具有操作简单，重复性高和节省时间的优点。可以用作整个植物感染的替代系统，为早期调节提供测试方法。
花是重要的粮食作物。植和生产仅次于水稻和小麦，位居世界第三，平均单产排名第一[1]。花真菌是影响其产量的重要因素，其中尤以由Exererohilum turcicum和Bipolaris zeicola引起的叶片疾病为甚[2-3]。1959年，蒋光正等人的报道首次报道了中国桂花圆斑病的发生[5-7]，它可以感染叶子，耳朵，lo叶，桂花的鞘和茎[8-9]。物致病细菌引起的损害主要与植物中活性氧代谢的失调有关[4]，包括苯丙氨酸氨解酶（PAL），过氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶。SOD）和过氧化氢酶（CAT）等[5]。
究表明，病原体感染植物后，与病程相关的蛋白质（PRs）会发生变化，并且亮氨酸转录因子（bZIPs）参与细菌的防御和环境限制的反应[ 6]。本的亮氨酸拉链蛋白（bZIP）是在人，动物，植物，微生物和昆虫中发现的真核生物中的独特转录因子[7]。植物中，bZIP家族的不同成员参与各种生物学过程[8-9]，即：bZIP转录因子B亚家族基因是膜结合转录因子（MTTF）。内质网。力（ER）和其他压力反应[10]。于整个植物的感染操作相对复杂并且状态控制困难，所以重复性差。一方面，体外叶片的侵染可以在短时间内模拟整个植物感染的效果，但是尚未对此方面进行研究。该实验中，研究了在疾病侵袭开始时与植物bZIP转录因子中B亚科病原体相关的蛋白质。快速，轻松地研究早期调节奠定基础，并提供更好的测试方法。国农业大学的龚志忠教授提供了桂花家族的B73株和桂花由第一所康复大学的生命科学学院的微生物学实验室保存。龙江八月土壤。铃薯培养基（PDA），桂花籽汁培养基（桂花幼苗200克，葡萄糖20克，琼脂粉20克和蒸馏水容量1000毫升）。无菌手术台中，病原细菌的菌丝被接种环捕获，并在桂花幼苗的浸泡果汁培养基中被激活，然后置于28°C的恒温培养箱中进行灭菌。置培养，直到菌丝形成完整的培养皿。长的病原体垂直划线到直径0.5厘米的培养皿中的培养皿中，并将细菌正面朝下接种在PDA的培养皿中，并在28°C的恒温下培养。
丝体被所有培养基覆盖，可以将其从培养箱中取出，并在室温下置于黑暗中以促进孢子萌发。发：按照1进行营养的花土（灭菌）：[KG- * 3] 1与with石混合，将100克放入直径为10厘米的小锅中，然后将小锅放入碗中浸泡水，桂花，气味宜人。种子直接播种在浸入水中的盆中，深度约1至1.5厘米，然后在人工气候箱（28°C）中生长。C，在阴凉处光照16小时，持续8小时），并在大约三天后发芽。移幼苗：当幼苗到达三叶1心脏阶段时，将其移入直径40厘米的大花盆中，并根据“大田土壤：[KG- * 3]木炭”进行混合。头= 1：[KG- * 3] 1“）。镊子彻底挖出整个幼苗，并轻轻摇动土壤根部，以施用基本肥料（氮，磷和钾肥）。果残留物过多，可以先在池塘中然后在土壤中轻轻洗净（尽量不要伤害根部）。），然后倒入足够的水。植植物后，进行温室栽培，将室内温度保持在30°C，桂花树价格相对湿度为60％，定期进行温度监测，使用湿度计和风扇以及水幕，每周用肥料浇水一次由5克组成每桶10升自来水的比例为3升。外：取具有均匀生长和孢子萌发的病原体平板，并使用穿孔器沉积与细菌盒相同的大小。桂花达到约7片叶子和1个心期时，将第3和第4片叶子切开，并将具有相同发育状态的3〜5 cm 1的切片放在直径90 mm的玻璃培养皿中，湿滤纸，打印面朝上。细菌放在细菌盒上，使细菌的一面朝下。
过M-MLV在cDNA中逆转录，然后使用Toyobo的SYBR Green Realtime PCR母粒进行实时PCR。应过程如下：94℃30秒，94℃5秒，55℃30秒和72℃15秒，总共40个循环。用18S作为内部参考，通过2-ΔΔCt方法分析基因的相对表达。图1可以看出，在体外接种叶片和活叶后，桂花轮虫在接种后2 h出芽，菌丝体在12 h和25 h侵入组织。丝增加了24小时。指出，体外细菌接种和整个生物体的接种对中华稻。感染过程没有影响，在实验过程中可以替换活植物。图2中可以看出，叶片活性与全叶活性呈现出先下降后升后降的相同趋势，但变化不明显，整体稳定。合荧光参数Fv / Fm表示光合系统II（PSII）的最大光合潜力，这是反映植物生长状态的重要生理指标。图3中可以看出，接种了O叶片的叶片的光合荧光参数Fv / Fm。
图3中还可以看出，离体叶片和活叶片的Fv / Fm光合荧光参数在正常范围的小范围波动内。华稻草后[WTBX] [STBX]基因pr3，pr5 [WTBZ] [STBZ]的实时PCR结果。图4可以看出，[WTBX] [STBX] pr3和pr5 [WTBZ] [STBZ]基因的表达在体外接种叶后24小时被上调，并且上述两个基因也由体内感染积极调节12至24小时。说，病原体的入侵在体内和体外调节了叶片中相关标记基因的表达，并且该植物已经启动了病原体入侵程序来防止入侵。菌的表达，即pr基因表达的上调。bZIP转录因子是植物中普遍存在的一种转录因子，参与各种胁迫的早期调控。侵时受到管制。关敏感基因的表达可抵抗外界压力。Bzip28，bzip17和bzip60都是膜转录因子，从图5中可以看出，接种后在体外或体内叶片中都发现了[WTBX] [STBX] bzip28 [WTBZ] [STBZ]桂花。达水平显着上调，并且两者一致地进行。
过显微镜观察，POD酶活性，NBT-反应性氧染色，光合荧光参数和关键基因表达分析来观察侵染的叶片，以比较两者的作用。感染开始时在植物上感染了系统。果表明，在感染开始时，体外叶片侵染与全身侵染之间没有显着差异，桂花树价格而体外叶片侵染更简单，更容易。体内重现性更高。果表明，在研究调节病原体诱导基因的下游靶基因信号传导途径时，在感染开始时，可采用简便，快速的备份方法进行备份。试设备，可以使用。bZIP转录因子占总数的很大一部分，不同物种包含bZIP转录因子基因家族的不同成员。在胁迫下调节植物的基因表达中起重要作用。
录因子，也称为反式作用因子，可以直接或间接识别或结合各种顺式作用元件的中心序列，从而参与调节靶基因转录效率的蛋白质，并且广泛参与低温植物抗性，干旱，高盐含量和病害。对同等压力并调节植物生长发育。去，许多关于bZIP转录因子的研究都集中在调节非生物胁迫（如干旱，高盐含量和激素）的机制上，但是关于转录因子功能的报道很少。bZIP在生物胁迫下，尤其是对病原体感染的反应。索仍不完美。点病的体外和体内植物研究证实，bZIP转录因子在信号转导途径的早期发挥作用，并且叶片在24小时后仍保持其正常的生理状态。染。亚军指出，为避免细菌盘脱落，有必要用木片或绳索将其固定[16]，这导致了测试。到一些困难，将本实验中的体外接种方法接种到培养皿中，没有细菌盒分离的问题，结合以上测试数据即可确定初步，在病原体感染开始时，即在72小时内。子的接种方法被用作一种实用且快速的测试方法。
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花是重要的粮食作物。植和生产仅次于水稻和小麦，位居世界第三，平均单产排名第一[1]。花真菌是影响其产量的重要因素，其中尤以由Exererohilum turcicum和Bipolaris zeicola引起的叶片疾病为甚[2-3]。1959年，蒋光正等人的报道首次报道了中国桂花圆斑病的发生[5-7]，它可以感染叶子，耳朵，lo叶，桂花的鞘和茎[8-9]。物致病细菌引起的损害主要与植物中活性氧代谢的失调有关[4]，包括苯丙氨酸氨解酶（PAL），过氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶。SOD）和过氧化氢酶（CAT）等[5]。
究表明，病原体感染植物后，与病程相关的蛋白质（PRs）会发生变化，并且亮氨酸转录因子（bZIPs）参与细菌的防御和环境限制的反应[ 6]。本的亮氨酸拉链蛋白（bZIP）是在人，动物，植物，微生物和昆虫中发现的真核生物中的独特转录因子[7]。植物中，bZIP家族的不同成员参与各种生物学过程[8-9]，即：bZIP转录因子B亚家族基因是膜结合转录因子（MTTF）。内质网。力（ER）和其他压力反应[10]。于整个植物的感染操作相对复杂并且状态控制困难，所以重复性差。一方面，体外叶片的侵染可以在短时间内模拟整个植物感染的效果，但是尚未对此方面进行研究。该实验中，研究了在疾病侵袭开始时与植物bZIP转录因子中B亚科病原体相关的蛋白质。快速，轻松地研究早期调节奠定基础，并提供更好的测试方法。国农业大学的龚志忠教授提供了桂花家族的B73株和桂花由第一所康复大学的生命科学学院的微生物学实验室保存。龙江八月土壤。铃薯培养基（PDA），桂花籽汁培养基（桂花幼苗200克，葡萄糖20克，琼脂粉20克和蒸馏水容量1000毫升）。无菌手术台中，病原细菌的菌丝被接种环捕获，并在桂花幼苗的浸泡果汁培养基中被激活，然后置于28°C的恒温培养箱中进行灭菌。置培养，直到菌丝形成完整的培养皿。长的病原体垂直划线到直径0.5厘米的培养皿中的培养皿中，并将细菌正面朝下接种在PDA的培养皿中，并在28°C的恒温下培养。
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过M-MLV在cDNA中逆转录，然后使用Toyobo的SYBR Green Realtime PCR母粒进行实时PCR。应过程如下：94℃30秒，94℃5秒，55℃30秒和72℃15秒，总共40个循环。用18S作为内部参考，通过2-ΔΔCt方法分析基因的相对表达。图1可以看出，在体外接种叶片和活叶后，桂花轮虫在接种后2 h出芽，菌丝体在12 h和25 h侵入组织。丝增加了24小时。指出，体外细菌接种和整个生物体的接种对中华稻。感染过程没有影响，在实验过程中可以替换活植物。图2中可以看出，叶片活性与全叶活性呈现出先下降后升后降的相同趋势，但变化不明显，整体稳定。合荧光参数Fv / Fm表示光合系统II（PSII）的最大光合潜力，这是反映植物生长状态的重要生理指标。图3中可以看出，接种了O叶片的叶片的光合荧光参数Fv / Fm。
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录因子，也称为反式作用因子，可以直接或间接识别或结合各种顺式作用元件的中心序列，从而参与调节靶基因转录效率的蛋白质，并且广泛参与低温植物抗性，干旱，高盐含量和病害。对同等压力并调节植物生长发育。去，许多关于bZIP转录因子的研究都集中在调节非生物胁迫（如干旱，高盐含量和激素）的机制上，但是关于转录因子功能的报道很少。bZIP在生物胁迫下，尤其是对病原体感染的反应。索仍不完美。点病的体外和体内植物研究证实，bZIP转录因子在信号转导途径的早期发挥作用，并且叶片在24小时后仍保持其正常的生理状态。染。亚军指出，为避免细菌盘脱落，有必要用木片或绳索将其固定[16]，这导致了测试。到一些困难，将本实验中的体外接种方法接种到培养皿中，没有细菌盒分离的问题，结合以上测试数据即可确定初步，在病原体感染开始时，即在72小时内。子的接种方法被用作一种实用且快速的测试方法。
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