[桂花树价格]稻曲抗TuMV分子标记辅助选择技术的研究
时间：2019/10/19 6:36:46 浏览量：
分离的种群与8407国家反源的源材料DaMV吸虫芜菁花叶病毒和冠291基本种质材料芜菁花叶病毒高灵敏度紧密地验证的分子标记的检测精度构造相关mBr4055 BrID10723和芜菁花叶病毒的抗性基因，桂花树价格TuRBCS01的两侧。系F2：3由自相交构造107分的个人从上面F2代的两种分离物，和抗芜菁花叶病毒每个家庭是为了确定对TuMV抗性和植物的基因型被确定原F2。用标记的上面，检测到107个个人F2代的两种引物和检测所述标记的准确度已计算出的检测结果的基础上与电阻的识别的结果，以对疾病。果表明，有22纯合的和疾病抗性菌株，2是杂合的抗病性和其它纯合和抗病。
测精度为90.9％; 48株检测为杂合的和抗病，5个纯合和抗病性，和5纯合易感，杂合和其他抗病，具有79.2％的检测精度。23株被鉴定为纯合的两个标记和抗病性得到了验证，其中包括4株为杂合子和抗病和一种菌株是纯合的，抗病。别的准确率为78.3％。述试验结果奠定了分子标记辅助选择一个更好的使用mBr4055和BrID10723标志的基础。daguihua是中国重要的蔬菜，病毒病的主要疾病，影响生产中国桂花，病毒芜菁花叶（芜菁花叶病毒）是主要病原[1]。的抗芜菁花叶病毒桂花选择的传统方法有很长的周期，低效率和médiocre.L'utilisation选择精度辅助选择分子标记可以显著加快选择过程，并提高工作效率和选择的准确度。年来，桂花树价格与抗性连锁桂花一些芜菁花叶病毒分子标记在国内外开发的。
一七[2]检查紧密连锁的抗芜菁花叶病毒基因樨2个RAPD标记，具有分别为9.5 cM和15.36厘米，接合距离。和同事[3]中使用的AFLP方法筛选紧扣基因芜菁花叶病毒Daguihua敏感7.5 cM和8.4 cM的相应的链路的距离2个AFLP标记。华Zhang等人[4]讨论了两个标记IS PCR-AFLP链接到Daguihua芜菁花叶病毒的抗性基因与为6.5cm的接合距离。韦Zhang等人[5]使用的多模型映射QTL的方法，用于检测QTL 3（涂-1，涂-TU-2和3）与芜菁花叶病毒和AFLP标记E36M47-7（2.9厘米）相关联。E33M60-5（0.5厘米）和E36M59-5（2.4厘米）分别与上述三个QTL相关联。Rusholme等人[6]已经表明，RFLP标记pN202e1是共分离与抗性基因retr01芜菁花叶病毒隐性位于樨的4号染色体; RFLP标记pO52e2和pO85e1和芜菁花叶病毒占主导地位的位于染色体8种桂花的ConTR01抗性基因共分离。Qian等人[7]已经报道了标记个Indel BrID10694（0.3厘米）和BrID101309（0.6厘米）有密切的关系retr02隐性抗性基因芜菁花叶病毒樨和位于基因的两侧。的结果等人[8]表明，SSR标记H132A24-S1（0.2厘米）和KS10960（0.6厘米）密切相关抗性基因香芜菁花叶病毒显性和位于基因的两侧。研究小组确定了两个主要的抗性基因桂花芜菁花叶病毒 - retr02隐性抗病基因芜菁花叶病毒[9]和对TuMV TuRBCS01 [11]抗性基因的优势基因，并筛选了SSR标记紧密相连HCC259到retr02（3.8厘米）[12]和9个SSR标记紧扣或个InDel TuRBCS01其中SSR标记mBr4055 BrID10723个InDel和位于TuRBCS01基因，分别的任一侧，并且键合距离该基因是分别为0.6 cM和1.3厘米。]。究检测分子标记的准确性，有利于更好地为通过分子标记辅助选择使用。等[14]表明，TCR01，这是密切相关的基因CRB根病，桂花，可以准确地识别纯合抗性的植物。
Zhang等人[15]使用的小麦Vrn的-D1的特异性标志物基因春化以识别茎F2的冬季和春季：3姐妹混合12和石家庄号8的结果对应于结果表型鉴定。等[16]用于镰刀的SNP标记西瓜电阻和两个自交群体BC1F2代673经过两次四倍体材料西瓜（NF3接收机，用于易感染疾病和JH抗病） 。别植物进行了测试，结果表明，纯合基因型与表型鉴定结果一致。
前，尚未见报道的辅助选择技术，使用抗芜菁花叶病毒Daguihua分子标记。这项研究中，对TuMV每个家庭F2的电阻：3的鉴定通过构建家庭F2：抗芜菁花叶病毒8407材料Daguihua和敏感冠291的材料3，然后将电阻芜菁花叶病毒和生成的基因型原F2。
过组合所述标记检测结果，检测该标记的准确度进行了分析，以奠定了使用分子标记的抗性基因的两侧紧密连锁的辅助选择基因的基础芜菁花叶病毒TuRBCS01。体材料的抗病是抗源国家源8407达曼香芜菁花叶病毒材料，并且起始材料是高芜菁花叶病毒sensibilité.LaF2代107种单植物的种质中央材料291和生成由父母双方建立单一F2植物都是自建。庭F2：3用作研究和学习技术选择通过分子标记辅助的对象TuMVCS01一个芜菁花叶病毒抗性基因樨L.将上述材料接种到原浆养分的直径为7〜8厘米和培养用营养基于溶胶泥炭Kelamann-Deilmann.La温度人工气候室为25℃，湿度为40％至60％，强度光9 000-10。000 LX，照明时间每天11.5小时。来自中国农业科学院蔬菜花卉研究所引进的C4芜菁花叶病毒株，是疾病，灭菌一个月接种前的原因，病叶用于接种的家长控制和测试设备。用快速提取试剂盒的基因组DNA plante.Les具体步骤如下从107个个体样品樨L. F2代提取基因组DNA：添加适当量的TE洗脱缓冲液，溶解在水浴中的DNA在65℃下进行10至60分钟，然后搅拌该混合物。该溶液溶解几次，最后得到的DNA溶液。
浓度和提取的DNA的纯度用分光光度计测量，并使用琼脂糖凝胶1％通过电泳检测到。用前将其与去离子水稀释至70纳克/微升。实验中使用的引物是所述SSR标记mBr4055和个InDel BrID10723在TuRBCS01基因的两端，所述引物mBr4055为5“‘-GCTTTCCTCGTGTCATTAGA-3’和5'-CTTTCCGAGTTTCCATAGTG的上游和下游序列 - 。
亲本扩增条带8407的类型兼容的单基因型被指定为A.与亲代冠291被指定为B的类型杂合带中的放大波段的类型兼容的独特基因型被指定以H至芜菁花叶病毒的F2植株抗性按照病情指数F2干3.病情指数是“0”时，每个植物的基因型评为AA和健康指数评估是0和55.55之间。AA，病情指数高于55.55和每株植物的基因型是AA指出。于抗病性和PCR扩增的单个结果的鉴定，检测上TuRBCS01基因mBr4055和BrID10723两侧的标记的准确度进行了分析。过在1％琼脂糖凝胶电泳检测出的提取的样品的基因组DNA，而不拖动（图1）。比率OD260 /样品的OD280用分光光度计1.8和2之间确定的， 0，表明DNA提取质量是高的，并且可以被用于PCR扩增。于标记，其功能受到许多因素的影响，为此的F2或BC1代的个体特征的识别，难以更好地利用辅助选择分子标记的影响，有必要进一步检查招家庭F2：3的识别精度。
静[15]和焦榆[16]使用的F2：3和BC1F2代检查标记的有效性。等人[14]已经使用37共显性标志物TCR01和TCR05，密切相关的根病抗性基因，该基因CRB检测37个抗性品种疝和10个非抗性品种根病。18个频带标记品种TCR01200 TCR05279和有抗性的品种，但品种两个带的上面不延伸的，有些是与一些抗性品种不是抗性品种。报道，TCR01 TCR05和标记可以选择性地用于抗病品种筛选。3个家庭抗芜菁花叶病毒设备Daguihua的8407和291皇冠敏感材料，并BrID10723的单链mBr4055菌株：在本研究中，原产F2植株的基因型是由F2的性状鉴定该基因的TuRBCS01双方进行扩增和测试。
记的发电设施F2鉴定的准确性。果表明，与所述两个标记纯合抗性菌株的检测是最佳的，具有90.9％的检测精度，接着菌株耐杂合和纯合易感，和79.2％的检测精度和78.3％之间。述试验结果提供更好的使用上述用于辅助选择分子标记两种标记的基础。
本文转载自
桂花树价格 http://m.guihua99.net/m/
测精度为90.9％; 48株检测为杂合的和抗病，5个纯合和抗病性，和5纯合易感，杂合和其他抗病，具有79.2％的检测精度。23株被鉴定为纯合的两个标记和抗病性得到了验证，其中包括4株为杂合子和抗病和一种菌株是纯合的，抗病。别的准确率为78.3％。述试验结果奠定了分子标记辅助选择一个更好的使用mBr4055和BrID10723标志的基础。daguihua是中国重要的蔬菜，病毒病的主要疾病，影响生产中国桂花，病毒芜菁花叶（芜菁花叶病毒）是主要病原[1]。的抗芜菁花叶病毒桂花选择的传统方法有很长的周期，低效率和médiocre.L'utilisation选择精度辅助选择分子标记可以显著加快选择过程，并提高工作效率和选择的准确度。年来，桂花树价格与抗性连锁桂花一些芜菁花叶病毒分子标记在国内外开发的。
一七[2]检查紧密连锁的抗芜菁花叶病毒基因樨2个RAPD标记，具有分别为9.5 cM和15.36厘米，接合距离。和同事[3]中使用的AFLP方法筛选紧扣基因芜菁花叶病毒Daguihua敏感7.5 cM和8.4 cM的相应的链路的距离2个AFLP标记。华Zhang等人[4]讨论了两个标记IS PCR-AFLP链接到Daguihua芜菁花叶病毒的抗性基因与为6.5cm的接合距离。韦Zhang等人[5]使用的多模型映射QTL的方法，用于检测QTL 3（涂-1，涂-TU-2和3）与芜菁花叶病毒和AFLP标记E36M47-7（2.9厘米）相关联。E33M60-5（0.5厘米）和E36M59-5（2.4厘米）分别与上述三个QTL相关联。Rusholme等人[6]已经表明，RFLP标记pN202e1是共分离与抗性基因retr01芜菁花叶病毒隐性位于樨的4号染色体; RFLP标记pO52e2和pO85e1和芜菁花叶病毒占主导地位的位于染色体8种桂花的ConTR01抗性基因共分离。Qian等人[7]已经报道了标记个Indel BrID10694（0.3厘米）和BrID101309（0.6厘米）有密切的关系retr02隐性抗性基因芜菁花叶病毒樨和位于基因的两侧。的结果等人[8]表明，SSR标记H132A24-S1（0.2厘米）和KS10960（0.6厘米）密切相关抗性基因香芜菁花叶病毒显性和位于基因的两侧。研究小组确定了两个主要的抗性基因桂花芜菁花叶病毒 - retr02隐性抗病基因芜菁花叶病毒[9]和对TuMV TuRBCS01 [11]抗性基因的优势基因，并筛选了SSR标记紧密相连HCC259到retr02（3.8厘米）[12]和9个SSR标记紧扣或个InDel TuRBCS01其中SSR标记mBr4055 BrID10723个InDel和位于TuRBCS01基因，分别的任一侧，并且键合距离该基因是分别为0.6 cM和1.3厘米。]。究检测分子标记的准确性，有利于更好地为通过分子标记辅助选择使用。等[14]表明，TCR01，这是密切相关的基因CRB根病，桂花，可以准确地识别纯合抗性的植物。
Zhang等人[15]使用的小麦Vrn的-D1的特异性标志物基因春化以识别茎F2的冬季和春季：3姐妹混合12和石家庄号8的结果对应于结果表型鉴定。等[16]用于镰刀的SNP标记西瓜电阻和两个自交群体BC1F2代673经过两次四倍体材料西瓜（NF3接收机，用于易感染疾病和JH抗病） 。别植物进行了测试，结果表明，纯合基因型与表型鉴定结果一致。
前，尚未见报道的辅助选择技术，使用抗芜菁花叶病毒Daguihua分子标记。这项研究中，对TuMV每个家庭F2的电阻：3的鉴定通过构建家庭F2：抗芜菁花叶病毒8407材料Daguihua和敏感冠291的材料3，然后将电阻芜菁花叶病毒和生成的基因型原F2。
过组合所述标记检测结果，检测该标记的准确度进行了分析，以奠定了使用分子标记的抗性基因的两侧紧密连锁的辅助选择基因的基础芜菁花叶病毒TuRBCS01。体材料的抗病是抗源国家源8407达曼香芜菁花叶病毒材料，并且起始材料是高芜菁花叶病毒sensibilité.LaF2代107种单植物的种质中央材料291和生成由父母双方建立单一F2植物都是自建。庭F2：3用作研究和学习技术选择通过分子标记辅助的对象TuMVCS01一个芜菁花叶病毒抗性基因樨L.将上述材料接种到原浆养分的直径为7〜8厘米和培养用营养基于溶胶泥炭Kelamann-Deilmann.La温度人工气候室为25℃，湿度为40％至60％，强度光9 000-10。000 LX，照明时间每天11.5小时。来自中国农业科学院蔬菜花卉研究所引进的C4芜菁花叶病毒株，是疾病，灭菌一个月接种前的原因，病叶用于接种的家长控制和测试设备。用快速提取试剂盒的基因组DNA plante.Les具体步骤如下从107个个体样品樨L. F2代提取基因组DNA：添加适当量的TE洗脱缓冲液，溶解在水浴中的DNA在65℃下进行10至60分钟，然后搅拌该混合物。该溶液溶解几次，最后得到的DNA溶液。
浓度和提取的DNA的纯度用分光光度计测量，并使用琼脂糖凝胶1％通过电泳检测到。用前将其与去离子水稀释至70纳克/微升。实验中使用的引物是所述SSR标记mBr4055和个InDel BrID10723在TuRBCS01基因的两端，所述引物mBr4055为5“‘-GCTTTCCTCGTGTCATTAGA-3’和5'-CTTTCCGAGTTTCCATAGTG的上游和下游序列 - 。
亲本扩增条带8407的类型兼容的单基因型被指定为A.与亲代冠291被指定为B的类型杂合带中的放大波段的类型兼容的独特基因型被指定以H至芜菁花叶病毒的F2植株抗性按照病情指数F2干3.病情指数是“0”时，每个植物的基因型评为AA和健康指数评估是0和55.55之间。AA，病情指数高于55.55和每株植物的基因型是AA指出。于抗病性和PCR扩增的单个结果的鉴定，检测上TuRBCS01基因mBr4055和BrID10723两侧的标记的准确度进行了分析。过在1％琼脂糖凝胶电泳检测出的提取的样品的基因组DNA，而不拖动（图1）。比率OD260 /样品的OD280用分光光度计1.8和2之间确定的， 0，表明DNA提取质量是高的，并且可以被用于PCR扩增。于标记，其功能受到许多因素的影响，为此的F2或BC1代的个体特征的识别，难以更好地利用辅助选择分子标记的影响，有必要进一步检查招家庭F2：3的识别精度。
静[15]和焦榆[16]使用的F2：3和BC1F2代检查标记的有效性。等人[14]已经使用37共显性标志物TCR01和TCR05，密切相关的根病抗性基因，该基因CRB检测37个抗性品种疝和10个非抗性品种根病。18个频带标记品种TCR01200 TCR05279和有抗性的品种，但品种两个带的上面不延伸的，有些是与一些抗性品种不是抗性品种。报道，TCR01 TCR05和标记可以选择性地用于抗病品种筛选。3个家庭抗芜菁花叶病毒设备Daguihua的8407和291皇冠敏感材料，并BrID10723的单链mBr4055菌株：在本研究中，原产F2植株的基因型是由F2的性状鉴定该基因的TuRBCS01双方进行扩增和测试。
记的发电设施F2鉴定的准确性。果表明，与所述两个标记纯合抗性菌株的检测是最佳的，具有90.9％的检测精度，接着菌株耐杂合和纯合易感，和79.2％的检测精度和78.3％之间。述试验结果提供更好的使用上述用于辅助选择分子标记两种标记的基础。
本文转载自
桂花树价格 http://m.guihua99.net/m/
首页
微信