[桂花树价格]分子标记技术及其在桂花遗传选择中的应用

　　概述了分子标记的基本类型，并在分子多样性分析，种子纯度鉴定，遗传图谱构建，基因作图方面进行了分子标记技术研究。述了桂花的分子标记辅助选择方法。析了应用前景，以促进分子标记技术在桂花遗传选择中的更好应用。传标记包括形态标记，细胞标记，生化标记和分子标记，它们是植物遗传改良的有力工具[1]。中，前三个遗传标记是对基因的间接反应，是差异基因表达的结果。子标记物是为DNA开发的遗传标记物，可直接对核苷酸差异做出反应，并且具有优于传统标记物的优越性：区分所有基因型的共性以及极高和定量的多态性。几乎是无限的，分析的结果不受材料的位置和时间的限制，它们不影响植物的正常活动或目标性状的表达。前，DNA分子标记技术已广泛应用于植物遗传选择研究，已成为分子选择的重要方向。蓝型油菜（Brassica campestris syn.rapa L.ssp.pekinensis）是芸苔属的桂花属的一个亚种，原产于中国，在世界范围内栽培了5，000多年。常生活中最重要的蔬菜之一。着分子标记技术的飞速发展，无臭桂花的遗传选择得到了前所未有的修改：已广泛用于构建遗传图谱，遗传多样性分析，遗传图谱，桂花种子纯度的鉴定和分子标记。助选择和选择等，极大地促进了桂花新品种的选择。者综述了分子标记的常见类型及其在桂花选择中的应用，为桂花的遗传选择提供参考。子标记直接反映核苷酸的个体差异。子标记通常分为三类：一类基于Southern杂交，桂花树价格例如RFLP；另一类基于基于PCR的标记技术，例如RAPD，ISSR和SSR。PCR与AFLP和CAPS等标记技术相结合。前，主要的桂花开花产品是RFLP，RAPD，ISSR，SSR和AFLP。制性片段长度多态性（RFLP）RFLP标记是由Botstein等人[2]于1980年发现的。是第一代分子标记，已广泛用于植物遗传学研究。择。本原理：限制性核酸内切酶用于鉴定和切割个体的基因组。过PAGE电泳分离后，进行与特定探针的Southern杂交，然后通过放射自显影或其他显色技术进行检测以获得RFLP基序。切割位点之间存在差异时，这将导致RFLP上的多态性。RFLP标记是第一代分子标记，具有强大的共显性和稳定性。已经成为基因选择研究中领先的分子标记工具。着PCR技术的诞生和发展，RFLP已逐渐被其他易于检测且具有高多态性信息的标记所取代。机扩增多态性（RAPD）DNA Welsh等。[3]在1990年基于PCR技术开发了RAPD分子标记技术。理：通过在生物基因组中使用大量反向重复序列，可以使用单个随机引物扩增重复序列之间的片段， PCR产物可以通过凝胶电泳和染色检测。果引物的结合位点发生突变，或者在扩增的片段中发生核苷酸的插入/缺失，则可能会发生多态性。RFLP标记相比，RAPD标记具有以下优点：非常通用，可以共享RAPD标记，少量的DNA样品可以满足RAPD的需要，检测方便且成本低高。时，RAPD也有一些缺点：RAPD标记的可重复性和稳定性差，并且对反应条件极为敏感； RAPD标记是主要标记，不能用于基因型分析。部简单重复序列（ISSR）ISSR技术是蒙特利尔大学Zietkiewicz等人开发的一种新的分子标记技术。[4]，1994年。本原理：简单的SSR重复序列广泛存在于基因组中，并有2至4个随机碱基随机锚定在SSR重复序列的3'或5'末端以形成引物。增，通常长16至18 bp。PCR反应扩增位于两个特定SSR位点之间的DNA片段。SSR序列的重复次数不同或锚定位点突变时，扩增的片段是多态的。ISSR标记技术结合了SSR和RAPD技术的优点：相对于RAPD标记具有更高的稳定性，比SSR标记具有更低的引物设计成本，缺点是ISSR标记是主要标记而不具有优势不能进行基因分型。
　　列重复（SSR）SSR标记（也称为微卫星标记）是一类DNA序列，由1至6个核苷酸组成，串联并串联重复，广泛分布于基因组中。本原理：当图案的重复次数不同或未完全重复时，这将导致扩增片段的大小不同，从而导致位点多态性。据微卫星两侧的保守序列，设计了特异性引物，并通过PCR扩增和PAGE电泳获得了SSR位点[5]。RAPD标记相比，SSR标记具有以下优点：SSR标记长度可变，桂花树价格并且具有多态性； SSR标记是共性标记，可用于基因分型； SSR标记可通过特异性引物扩增稳定性和可重复性更好。SSR品牌的缺点是开发成本高，耗时且费力。
　　增片段长度多态性（AFLP）Zabeau等。[6]在1993年基于RFLP和RAPD两种标记技术发明了AFLP标记技术。本原理：限制性核酸内切酶用于消化基因组DNA，该片段与特定的接头连接在T4 DNA连接酶的作用下形成特定的DNA片段，然后对其进行预扩增和选择性扩增。切割位点或选择性碱基结合位点突变时，形成多态性。AFLP结合了RFLP和RAPD的优势：少量DNA样品可以满足分析需求，稳定性，可靠性，其中大多数是主要标记，多态性也是高。点是测试过程复杂且昂贵，并且DNA的质量很高。传多样性分析遗传多样性是作物遗传改良和选择新品种的基础。子标记技术可以克服传统的遗传多态性与现场表型分析的弱点，具有高多态性，稳定性和客观性的优点，是一种强大的工具物种遗传多样性的研究。Lamboy等[7]，Sun Deling等[8]，Guo Jingxin等[9]使用不同的标记技术来分析具有愉悦气味的桂花蔬菜的遗传关系，结果表明酞菁和蔬菜桂花关系密切。气球桂花和大桂花之间存在一定的遗传距离，它们被组合在一起。宝勇等。[10]利用RAPD分子类型技术将11种大桂花遗传物质分为三种类型：直型，右过渡型，短堆型和短堆型。波等[11]利用AFLP技术研究了96种桂花遗传物质的遗传关系，结果表明可能有两个不同的起源。顺华等[12]通过RAPD技术分析了64种桂花资源的遗传多样性，显示桂花具有丰富的遗传基础，相似系数为0.951，最小值为0.681。用分子标记技术进行的遗传多样性分析不同于传统的形态学分类结果，这可能是由于材料内在基因的表达有限或基因组之间缺乏相关性造成的。达效果和外部形态。用分子标记对遗传多样性进行分析可以同时反映出形态学和表观形态之间核苷酸的潜在差异，结果更加准确。子纯度的鉴定纯度和真实性是衡量种子质量的主要标准。统的形态学识别方法可能会影响环境。需要很多时间并且很费力。不能满足当年使用的物种的要求。传指纹技术是近年来基于分子标记技术的种子纯度控制的一种新方法，具有以下优点：简单，方便，成本低，多态位点丰富，对种子无影响。境。已成为鉴定种子纯度的有力工具。顺华等。[13]使用AFLP引物的组合来研究90种大桂花材料，并获得了能够完全区分90种桂花材料的E-ACA / M-CTG引物组合。
　　晓义等。[14]用指纹图谱鉴定了80个小桂花品种，并使用80对引物组合来完全区分80个小桂花品种。树贵等[15]，关志坤等[16]利用RAPD技术和SSR技术研究了种子的纯度，获得了可用于鉴定“中薯5号”纯度的分子标记。鉴定了“玉盘3号”的纯度。因图谱的构建基因图谱是进行遗传研究的有力工具。已被广泛用于遗传作图，卡克隆和比较基因组学研究，以提高繁殖效率。统的遗传图谱是用形态学和生化标志物构建的，充满了诸如标志物数量有限和光谱密度低等问题：它不能很好地反映基因组的整体情况，其应用受到限制。分子标记构建的高密度遗传图谱克服了传统遗传图谱的不足，已被广泛用于作物遗传育种研究。Song和他的合作者[17]构建了桂花的第一个大型遗传图谱RFLP，其中桂花“ Michili”和“ Spring Broccoli”变种完全开花，全长为1 850 cM，包括10个结合基团和280个分子标记位点RFLP。Ajisaka等。[18]用不同品种的桂花构建了第一张桂花的RAPD分子标记图谱，包括115种RAPD标记和2种同工酶标记，图谱长度为860 cM。鲁刚等。[19]用大桂花和酞菁为亲本构建了F2定位种群，并利用RAPD分子标记技术构建了桂花的第一个遗传图谱，具有84个多态性位点，全长1 632.4厘米平均距离为16.5 cM。刚等[20]利用芜菁和桂花F2构建了AFLP图谱，包括131个AFLP标记和12个连锁组，总长度为1810.9 cM。Yukang等[21]绘制了一个包含87个RAPD标记和265个AFLP标记的图谱，其中包含102株桂花的F6（NIL）重组株，全长2665.7 cM，包括17个结合基团。均距离为7.6 cM。梅和他的合作者[22]用DaMV黄新高干TuMV和Baixingao抗TuMV花株构建了DH系，并构建了一个AFLP图谱，全长883.7 cM和255个标记。Soengas等[23]用223个AFLP和23个SSR标记构建了一个遗传图谱，共有664个AFM和10个连接基团。等。[24]使用桂花线“ Chiifu-401-42”和“ Kenshin-402-43”为父母构建了一个多标记图，总长为1182 cM，距离为平均地图。2.83 cM，包含10个接头，278个AFLP标记，235个SSR标记，25个RAPD标记和18个EST-STS-CAPS标记。俊华等。

　　[25]用GCIV诱导的株系感染了大桂花TuMV-C3高肿瘤，构建了一个多标记类型的遗传图谱，总图谱长度为683.9 cM，平均距离为卡为5.52 cM。含12个结合基团，6个EST-PCR-RFLP标记和118个AFLP标记。明科等。[26]用F2作图种群构建了RSAP的遗传图谱，总长度为821.3 cM，平均图谱距离为5.04 cM，包含117个RSAP，38个SRAP和5个SSR，以及3个RAPD标记。要性状的定位和分子标记辅助选择是桂花大规模选择的主要特征，传统育种方法主要依靠形态学标记和生化标记。于环境条件，生殖效率通常不高。子标记辅助选择（MAS）涉及使用与目标性状密切相关的分子标记来选择目标性状，根据传统的育种方法，分子标记辅助选择可以在苗期针对性状。择，共显性标记也可以用于基因型选择，因此在分子标记的辅助下进行选择可以大大提高选择效率。疾病抗性相关的分子标记和遗传作图。桂花具有病毒性疾病，霜霉病和软腐病三大疾病，直接影响桂花的性能和品质，提高抗病性一直是非常重要的要素。择大尺寸的桂花很重要。用分子标记技术发现和定位抗病基因并进行分子标记辅助选择，有利于促进遗传材料的创新和新品种的选择。一奇[27]，韩和平[28]使用不同的材料和分子标记物筛选与TuMV密切相关的分子标记物，并将其应用于TuMV桂花分子标记物辅助选择中。Zhang Xiaowei等[29]获得了三个TuMV2C4 QTL抗性位点，为TuMV抗性基因的定位，卡克隆和分子标记辅助选择奠定了基础。月强等。[30]使用BSA方法筛选了一个遗传距离为6.7 cM的RAPD标记，该标记与霜霉病抗性基因密切相关。iao等。[31]获得了与疝基因密切相关的AFLP标记，并成功转化为SCAR标记。慧慧等。[32]将抗疝气基因定位到A3染色体的0.18 cM区域。金华等。[33]获得了与软腐基因密切相关的分子标记，可用于分子标记辅助选择桂花。秀峰等。[34]绘制了干桂花的QTL，并获得了四个抗性QTL，为干性心脏病的繁殖奠定了基础。耐热性相关的分子标记和遗传作图。桂花气候寒冷，耐热育种一直是芬芳花卉育种者的主题之一。小英等。[35]用热敏和母体敏感材料获得了9个与耐热性相关的分子标记，贡献率为46.7％。Yu Kakang等。[36]使用复杂的作图方法检测了5个与桂花耐热性相关的QTL，并获得了5个与耐热位点密切相关的分子标记，可以将其应用于耐热桂花。子辅助选择。质量特性相关的分子标记。年来，随着人们对蔬菜品质的需求的提高，品质选择已成为大桂花选择的重要方向。中，草捆颜色的育种是桂花优质育种的重要组成部分。本等。[37]通过BSA方法获得了与大桂花橙心基因密切相关的三个RFLP标记。Wang等。[38]使用SPRA标记技术研究了桂花的橙色性状，该特性允许通过一对隐性基因控制字符并获得转化为SCAR标记的SRAP标记。离为3.7 cM，已应用于桔桂花的繁殖。友建等。[39]对桂花的紫色条纹进行了QTL作图研究，发现了三个QTL：qp-c1-1，qp-c1-2和qp-c1-3，贡献率为36％。别。得了与紫色性状基因座密切相关的四个分子标记，分别为44％和19％，为分子辅助选择桂花奠定了基础。明科等。[40]研究了桂花的紫色特征，这表明它们受一对主要基因的控制并且受微基因和环境的影响，并且两个与紫色特征相关的RAPD标记已经获得。在桂花的1号染色体上测序。男性不育有关的分子标记。花的主要品种主要是杂种，主要由雄性不育系产生。物的雄性不育分为三种类型：胞质雄性不育，雄核不育和胞质雄性不育。小辉等[41]，冯冬林等[42]利用各自的不育系和维持系获得了与细胞质雄性不育基因密切相关的标记。Ying等[43]，Zhang Hui等[44]使用BSA方法获得了与桂花隐性核雄性不育基因密切相关的分子标记，并将其定位在9号染色体上。[45]，张书江等[46]使用通过生育力分离的F2作为隔离种群，发现与主要雄性不育系密切相关的分子标记，并应用于分子标记介导的繁殖。辉等。[47]获得了两个与男性不育桂花的男性等位基因连锁的SSR标记，其遗传距离分别为7.92和4.95 cM，并位于Ms.基因的同一侧。子标记技术体现了个人从现象到本质的理解特征的过程。管分子标记物相对于其他标记物具有许多优点，但是它们仍具有某些缺点，并且其应用受到限制。测技术是发展DNA多态性作为遗传标记的基础技术，随着分子生物学技术的不断发展，理想的分子标记技术将最适合选择研究。培植物的遗传学。今为止，分子标记已被广泛用于桂花的遗传选择研究中，无论是用于遗传多样性分析，种子纯度鉴定，遗传图谱构建。重要农艺学特征的定位和分子辅助选择。步了，但是仍然存在一些问题。先，与桂花的重要农艺性状（例如抗逆性）密切相关的分子标记数量有限，这在一定程度上限制了分子标记辅助的选择。次，不同的研究人员正在使用大量的桂花和遗传标记物来诱导遗传。不能彼此集成，并且密度低且通用性差。着桂花基因组测序工作的完成，必将为遗传繁殖研究提供更多的序列信息，特定类型和数量的分子标记的发展将促进图谱的整合。快桂花的选择过程。
　　高繁殖效率。
　　本文转载自
　　桂花树价格 http://m.guihua99.net/m/