[桂花树价格]粉虱对桂花中防御酶基因相对表达的影响
时间：2019/11/21 6:33:36 浏览量：
我们的研究小组选择了四种具有令人愉悦气味的桂花系（＃4，＃13，＃19，＃76）作为测试材料，而桂花材料则作为对照。庆人没有抗拒白蝇，并接种了白色粉末。御酶基因在痰中的相对表达。果表明，桂花树价格接种粉虱后，不同桂花材料中5种防御酶（PPO，HPL，LOX，SOD，APX）的相对表达水平显着不同，且对粉虱的抵抗力也较高。
最高到最低排名第13和第4。庆市第19号，第76号。此，No. 13是种植桂花粉抗白新品种的首选。瓜（Cucumis sativus L.）是最重要的蔬菜作物之一，被称为蔬菜世界[1-3]。而，随着种植面积的不断扩大和集约化程度的提高，桂花病虫害的发生变得更加严重[4]，尤其是粉虱的危害，严重影响桂花的产量和质量[5]。于化学控制的预防和控制措施对密集和大规模生产带有令人愉悦气味的桂花产生了很大的负面影响。此，培育抗白粉的桂花新品种尤为重要，研究抗药性机理是选择的前提和关键。是具有生物催化功能的高分子量物质。际上，所有细胞活动都与相关酶的参与密不可分。
多研究还表明，酶促活性的水平与植物对昆虫的抗性和对逆境的抗性密切相关[6-12]。如，苯丙氨酸氨裂合酶（PAL）是苯丙烷代谢途径中的重要催化酶，苯丙氨酸是结合初级代谢和苯丙烷代谢的关键酶和限速酶。活性次要于次要和次要代谢率。代谢产物如酚，单宁，木质素和类黄酮的积累间接增加了植物对昆虫的抵抗力[13，14]，多酚氧化酶（PPO）可以催化植物中酚类化合物的氧化为形成锶为了使植物汁对害虫有毒并提高植物的抵抗力[15]，脂质过氧化氢裂解酶（HPL）和脂氧合酶（LOX）可以通过代谢途径催化不饱和脂肪酸形成C6和C9。化脂质。醇，酯，基于绿色物质的挥发性物质，因此提高了植物对逆境的抵抗力[16]，以及通过消除超氧自由基阴离子La可以产生H2O2，过氧化物酶（POD）的超氧化物歧化酶（SOD）过氧化氢酶（CAT）和抗坏血酸氧化酶（APX）具有分解H2O2的能力。是各种酶之间的协调和相互作用将细胞中的活性氧（ROS）保持在适当的水平，从而降低了ROS对植物的毒性并提高了植物的抗性[17] ]。外，APX是AsA-GSH循环中的关键酶之一（抗坏血酸-谷胱甘肽），与植物清除，衰老，抗病和抗螨虫有密切关系[18-21]。前，关于各种酶与植物抗性之间关系的研究更多地集中在不同相关酶的活性上，包括各种酶相关基因的表达水平和对这些酶的响应。花的抗药性。今为止尚未有报道。此，本实验使用了四种类型的桂花系（＃4，＃13，＃19，＃76），它们能抵抗由我们小组选择的螨虫作为测试材料，桂花不抗大庆。为参考，在接种粉虱后，测量了多酚氧化酶（PPO），脂氢过氧化物酶（HPL），脂氧合酶（LOX），超氧化物歧化酶（SOD）和抗坏血酸氧化酶（BPS）。APX）检查了五个防御酶基因的相对表达水平，以及在不同桂花材料中防御酶基因的相对表达水平，目的是加强对桂花材料的筛选和新品种的培育构成了理论基础。测试的材料选自4条完整的抗白桂花粉末生产线：4、13、19、76和部分白色粉末材料：大庆。虱蚜虫的来源是从山东农业大学第九农业园艺实验站的日光温室的桂花中收集的，并已被世代相传（昆虫源）。自山东农业大学温室温室盆栽的桂花。实验于2015年8月在山东农业大学9号实验园艺站阳光温室进行。择全谷物桂花种子进行浸泡和发芽，然后播种在塑料鲤鱼中（直径10厘米，高8厘米），每种植物均需进行有力且均匀的生长。每个温室中用60只白螨接种20株桂花，然后用由其制成的80目昆虫网将每株植物分开。种粉虱后，在第0、1、3、5和7天取整片叶子，立即用铝箔包裹并放在液氮罐中，然后迅速送回实验室待处理。放在-40°C的超低温冰箱中。御酶基因序列的确定乍一看拟南芥属基因库中的苯丙氨酸解氨酶（PAL），过氧化物酶（POD）和多酚的氧化（http：// /www.arabido psis.org/）酶（PPO），脂氢过氧化物酶（HPL），脂氧合酶（LOX），超氧化物歧化酶（SOD），抗坏血酸氧化酶（APX）基因序列，然后在桂花基因中在库（http://cucumber.genomics.org.cn/page/cucumber/index.jsp）中进行比对，并比较了其中的五个，即多酚氧化酶裂解（ PPO）和过氧化氢脂质。（HPL），脂氧合酶（LOX），超氧化物歧化酶（SOD）和抗坏血酸氧化酶（APX），尤其是PPO（CsPPO，Csa5M184820.1），HPL（CsHPL，Csa7MO41960.1），LOX（CsLOX，Csa2M023850.1） ，SOD（CsSOD，Csa1M573600.2）和APX（CsAPX，Csa1M479610.2）。用Beacon Designer 7软件进行引物设计，该软件使用五个与酶相关的基因序列作为模板来设计引物，请参见表1。关基因的实时荧光定量分析TIANGEN RNAprep试剂盒使用纯植物从桂花叶中提取RNA，并严格按照说明进行操作。用TransScript一步去除试剂盒和TransGen Biotech生产的Synthesis SuperMix cDNA合成cDNA，并保存在-20°C直至使用。时PCR仪的型号为Bio-Rad CFX96（美国），并根据SYBR Green PCR Master Mix规范制备定量PCR反应系统，每个样品设置为3。应条件在徐海峰等的方法中有描述。[22]。
中，使用UBI作为内部参考，每个基因扩增同时具有内部参考扩增，默认读取Ct值，并通过2-ΔΔCT[23]方法进行分析：△△CT =（CT，桂花树价格Target-CT ，UBI）（测试样品）-（CT，CT靶标，UBI）（校准样品）。试数据代表3次重复的平均值，使用Microsoft Excel 2010软件和DPS 7.05软件进行统计分析，并使用Duncan方法进行多次比较。种白色香桂花后，这五个酶基因的相对表达结果未在图1中显示。见，各种酶基因的相对表达水平均存在差异。粉虱的攻击有不同的反应。
种1天后，LOX和SOD基因的相对表达水平没有明显变化，而三种PPO，HPL和APX酶基因反应迅速，它们的表达水平已经大大减少了。种3天后，这5种酶基因的相对表达水平明显低于接种前水平。后，PPO酶基因的表达水平保持在较低水平；尽管HPL和APX酶的表达水平显着增加，但在接种7天后仍显着低于疫苗接种前水平。LOX酶基因的相对表达已在疫苗接种前水平重建；接种7天后，仅SOD酶基因的相对表达水平超过了接种前的水平。表明大庆对桂花对粉虱的伤害没有很好的反应，也就是说，它没有增加与挥发性酶有关的酶基因的相对表达（ HPL，LOX）可以防止昆虫接近并且没有增加昆虫毒性。级代谢物相关酶（PPO）基因的相对表达水平对消除了不利环境的酶基因（APX）的表达具有不利影响，并且能够消除由压力引起的损害的酶基因（SOD）也仅在白色蝇侵染7天后才能实现。些结果表明，大庆对桂花粉虱没有积极反应，因此对白粉虱没有抗性。种白桂花后，这五个酶基因的相对表达结果如图2所示。以看出，这五个酶基因的相对表达水平明显更高。
接种粉虱之前相比，在粉虱接种后第一天产生了磷，在第三天，从第五天到第七天接种了PPO，HPL，LOX和SOD酶。因的相对表达再次增加，各种酶基因的相对表达趋势先升高，然后降低，然后升高。APX基因外，PPO，HPL，LOX和SOD基因的平均相对表达量高于粉虱接种后1至7天接种白螨之前的相对表达量。种粉虱之前，请先接种1.33、1.88、4.43和1.29。均）。大庆对照相比，用粉虱接种了五个桂花酶基因的相对表达水平1-7天，但APX除外，后者高于接种前。得注意的是，可以看出第四桂花材料对粉虱侵袭非常敏感，随着时间的推移，它可以快速反应并合成大量次生代谢产物，从而防止或延缓新桂花的生长。击白蝇并迅速修复由白蝇造成的损害。种白桂花后这五个酶基因的相对表达结果如图3所示。以看出，接种后的五个酶基因的相对表达水平。虱通常在增加，尤其是在减少，其中接种一天后，PPO，HPL，LOX和SOD显着高于粉虱。3天通常较低，但仍高于疫苗接种前水平。PPO，HPL，LOX，SOD和APX基因的相对表达高于接种后第一天到接种后第七天的相对表达，大多数差异非常显着，平均分别为1.52、1.96 ，4.09、1.62、1.05接种之前。大庆对照相比，该酶的五个基因的相对表达对粉虱侵染具有显着的阳性反应，而第13桂花极易受到粉虱的伤害，并且比桂花4号。种白桂花后五个酶基因的相对表达结果如图4所示。以看出PPO，HPL，LOX和SOD的相对表达水平增加了。
种粉虱后1-7天，HPL酶的基因量大于接种前的量，并且APX表达大于接种前的量。大低于接种前。上面可以看出，在这五个酶中，只有三个HPL，LOX和SOD酶基因对粉虱有明显的反应，而桂花材料的编号为19具有对白蝇侵袭的一般敏感性，比4号和13号材料更好。种白桂花后五个酶基因的相对表达结果示于图2。5.可以看出，粉虱接种时LOX的表达比接种前显着增加，PPO，HPL和SOD的相对表达增加，但差异没有不明显，但APX表达明显降低。PPO和LOX基因的表达与接种前观察到的一致，并且HPL和APX基因的表达在接种后5天和7天后不明显。上可知，该酶的五个基因表达水平的变化对粉虱没有明显的反应，但是第76桂花材料的敏感性较低。粉虱的侵扰，反应比大庆防治效果强。
之，发现桂花材料接种后五个酶基因的相对表达水平被分类为＃13>＃4>＃19>＃76>对照。此，No。3是桂花粉抗白的新材料，它更加突出。究表明，同一寄主植物的不同品种，例如烟草，番茄，胡椒，cow豆等，对粉虱的抗性也不同（24-27），这密切相关在植物叶片中防御酶活性的变化[28，29]。海龙等[28]发现，辣椒叶片中POD和SOD防御酶引起的伤害增加，并且品种的抗性越高，这种增加就越大。玉雷等。[29]表明，烟粉虱在番茄品种不同后，幼虫的防御酶活性显着增加，而幼虫的防御酶活性不显着王涛等[30]发现如POD，PAL，PPO等该酶的活性通常很高，据信这三种酶的活性增加与突变型桂花对粉虱的抗性密切相关。这项研究中，发现接种粉虱1天，1-7天后，五个粉虱桂花中的五个酶基因的相对表达水平显着增加。4、13和19的接种总体趋势是上升-下降趋势。中，除APX以外，PPO，HPL，LOX和SOD基因的平均相对表达水平高于接种了1到7天的粉虱幼虫的相对表达水平。种后第1至7天的白色香水桂花，PPO和HPL，LOX，SOD和APX的相对表达高于接种前，且大多数达到了水平极显着，但只有19种酶的HPL，LOX和SOD基因对粉虱有明显的损害。LOX对第76次接种的反应仅比接种前显着增加，PPO，HPL和SOD基因的相对表达没有明显增加，但APX表达明显降低。种5〜7天后，PPO，HPL，LOX和APX的表达水平均不明显，且均低于接种前，发现对照材料为1〜2。种后7天，通常在接种前。PPO，HPL，LOX，APX等酶基因相比，相对表达水平下降。据整体分析，粉虱螨的抗性为13> 4> 19> 76>，这与五种基于桂花的材料的PPO活性相比到徐建鹏研究组的白蝇11〜7d。且每种材料的电阻顺序基本相同[31]。了获得更深入的抗性机制，还需要通过分子生物学和基因克隆进一步研究，以为桂花的选择提供更深入，更可靠的理论指导和理论支持。
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桂花树价格 http://m.guihua99.net/m/
最高到最低排名第13和第4。庆市第19号，第76号。此，No. 13是种植桂花粉抗白新品种的首选。瓜（Cucumis sativus L.）是最重要的蔬菜作物之一，被称为蔬菜世界[1-3]。而，随着种植面积的不断扩大和集约化程度的提高，桂花病虫害的发生变得更加严重[4]，尤其是粉虱的危害，严重影响桂花的产量和质量[5]。于化学控制的预防和控制措施对密集和大规模生产带有令人愉悦气味的桂花产生了很大的负面影响。此，培育抗白粉的桂花新品种尤为重要，研究抗药性机理是选择的前提和关键。是具有生物催化功能的高分子量物质。际上，所有细胞活动都与相关酶的参与密不可分。
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中，使用UBI作为内部参考，每个基因扩增同时具有内部参考扩增，默认读取Ct值，并通过2-ΔΔCT[23]方法进行分析：△△CT =（CT，桂花树价格Target-CT ，UBI）（测试样品）-（CT，CT靶标，UBI）（校准样品）。试数据代表3次重复的平均值，使用Microsoft Excel 2010软件和DPS 7.05软件进行统计分析，并使用Duncan方法进行多次比较。种白色香桂花后，这五个酶基因的相对表达结果未在图1中显示。见，各种酶基因的相对表达水平均存在差异。粉虱的攻击有不同的反应。
种1天后，LOX和SOD基因的相对表达水平没有明显变化，而三种PPO，HPL和APX酶基因反应迅速，它们的表达水平已经大大减少了。种3天后，这5种酶基因的相对表达水平明显低于接种前水平。后，PPO酶基因的表达水平保持在较低水平；尽管HPL和APX酶的表达水平显着增加，但在接种7天后仍显着低于疫苗接种前水平。LOX酶基因的相对表达已在疫苗接种前水平重建；接种7天后，仅SOD酶基因的相对表达水平超过了接种前的水平。表明大庆对桂花对粉虱的伤害没有很好的反应，也就是说，它没有增加与挥发性酶有关的酶基因的相对表达（ HPL，LOX）可以防止昆虫接近并且没有增加昆虫毒性。级代谢物相关酶（PPO）基因的相对表达水平对消除了不利环境的酶基因（APX）的表达具有不利影响，并且能够消除由压力引起的损害的酶基因（SOD）也仅在白色蝇侵染7天后才能实现。些结果表明，大庆对桂花粉虱没有积极反应，因此对白粉虱没有抗性。种白桂花后，这五个酶基因的相对表达结果如图2所示。以看出，这五个酶基因的相对表达水平明显更高。
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种粉虱后1-7天，HPL酶的基因量大于接种前的量，并且APX表达大于接种前的量。大低于接种前。上面可以看出，在这五个酶中，只有三个HPL，LOX和SOD酶基因对粉虱有明显的反应，而桂花材料的编号为19具有对白蝇侵袭的一般敏感性，比4号和13号材料更好。种白桂花后五个酶基因的相对表达结果示于图2。5.可以看出，粉虱接种时LOX的表达比接种前显着增加，PPO，HPL和SOD的相对表达增加，但差异没有不明显，但APX表达明显降低。PPO和LOX基因的表达与接种前观察到的一致，并且HPL和APX基因的表达在接种后5天和7天后不明显。上可知，该酶的五个基因表达水平的变化对粉虱没有明显的反应，但是第76桂花材料的敏感性较低。粉虱的侵扰，反应比大庆防治效果强。
之，发现桂花材料接种后五个酶基因的相对表达水平被分类为＃13>＃4>＃19>＃76>对照。此，No。3是桂花粉抗白的新材料，它更加突出。究表明，同一寄主植物的不同品种，例如烟草，番茄，胡椒，cow豆等，对粉虱的抗性也不同（24-27），这密切相关在植物叶片中防御酶活性的变化[28，29]。海龙等[28]发现，辣椒叶片中POD和SOD防御酶引起的伤害增加，并且品种的抗性越高，这种增加就越大。玉雷等。[29]表明，烟粉虱在番茄品种不同后，幼虫的防御酶活性显着增加，而幼虫的防御酶活性不显着王涛等[30]发现如POD，PAL，PPO等该酶的活性通常很高，据信这三种酶的活性增加与突变型桂花对粉虱的抗性密切相关。这项研究中，发现接种粉虱1天，1-7天后，五个粉虱桂花中的五个酶基因的相对表达水平显着增加。4、13和19的接种总体趋势是上升-下降趋势。中，除APX以外，PPO，HPL，LOX和SOD基因的平均相对表达水平高于接种了1到7天的粉虱幼虫的相对表达水平。种后第1至7天的白色香水桂花，PPO和HPL，LOX，SOD和APX的相对表达高于接种前，且大多数达到了水平极显着，但只有19种酶的HPL，LOX和SOD基因对粉虱有明显的损害。LOX对第76次接种的反应仅比接种前显着增加，PPO，HPL和SOD基因的相对表达没有明显增加，但APX表达明显降低。种5〜7天后，PPO，HPL，LOX和APX的表达水平均不明显，且均低于接种前，发现对照材料为1〜2。种后7天，通常在接种前。PPO，HPL，LOX，APX等酶基因相比，相对表达水平下降。据整体分析，粉虱螨的抗性为13> 4> 19> 76>，这与五种基于桂花的材料的PPO活性相比到徐建鹏研究组的白蝇11〜7d。且每种材料的电阻顺序基本相同[31]。了获得更深入的抗性机制，还需要通过分子生物学和基因克隆进一步研究，以为桂花的选择提供更深入，更可靠的理论指导和理论支持。
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