[桂花树价格]桂花防霉分子标记及相关基因研究进展
时间：2019/11/24 6:33:00 浏览量：
在病原体，发病机理，发病机理，分子因素，分离和分离等方面，已经研究了与桂花抗晚疫病有关的分子生物学研究进展。定晚疫病抗性基因。出了未来研究方向的展望。瓜发霉是一种全球性疾病，影响了70多个国家的桂花生产。菌是三大疾病之一，包括白粉病和霜霉病。花是一种世界性疾病，由真菌鞭毛枯草杆菌感染引起。适当的条件下，叶子变黄枯死，病害迅速发展，产量严重下降，导致桂花的产生。大的威胁。年来，关于桂花晚疫病的分子生物学研究有所增加，在抗病基因的分离，鉴定和分子标记方面取得了进展。者考察了桂花的分子标记及相关基因，抗霉菌的研究进展，并展望了今后的研究方向。氏假单胞菌（Pseudoperonospora cubnsis）（berk.et Curt。是一种专性的寄生细菌，属于镰刀菌属和假单胞菌属。原体的孢子囊是无色的，从气孔开始，单生或2-4束，上部3到5倍非常分枝，分支的末端是柠檬形的孢子囊或卵形。
芽率在15〜22℃[1]。疫病感染以叶子为主。种初期，子叶上先出现黄褐斑，形状不规则，然后病斑逐渐变黄，随着病情的发展，子叶迅速变黄变干，成虫阶段开始出现。子最初是浅绿色水中的浸点。胀后，黄绿色变成浅棕色，呈多边形。期病斑合并成一片，包裹在叶的边缘，整个叶子都干了。严重的情况下，植物的整个叶子都死亡[2]。两个时期都湿润时，在叶的背面上形成灰黑色的霉菌层。气，风和雨的流动是散发霉菌孢子的主要手段。气湿度要求很高，棚内结露，叶子上的水滴是外观的必要因素。子囊可在15°C下经过一个半小时后发芽。动孢子可发芽并侵袭两个小时。
灶形成后，空气湿度与孢子囊的速度和数量成正比。水滴和饱和水分的形式，寄主叶片的组织充满水，病灶的发展加剧，可能发生大的孢子囊，否则孢子囊不能发芽。晚疫病2至3天后发芽能力丧失。适的触发温度在15到24°C之间，低于15°C或高于28°C。难触发。度越高，触发越困难[3]。花品种的发病率存在差异。正常情况下，最易感的品种在低温下具有较早的成熟度和耐受性，而相对抗性的品种则更成熟且具有更高的耐热性。地势和排水良好的土壤适合桂花的生长，同时合理地施用基本肥料以及氮，磷和钾肥，以减少晚疫病的发生。子最经常在环境条件下产生，在明暗交替下，在连续光照下几乎不产生孢子囊[4]。花是一种非常潮湿的疾病，当叶子表面有水滴或水膜时，孢子囊会发芽。[5]表明接种病原体后2 h叶片的水合作用可能会在宿主被细菌入侵后引起疾病和环境湿度。对疾病的发展影响很小。Cohen等[6]发现，孢子囊产生和感染的合适温度为15-20°C。究发现，发病后的天数之间存在抛物线关系孢子囊的症状和累积量，以及活叶片每单位面积产生的孢子囊量大于离体叶片[7]。状发作后的天数与孢子囊和病变区域的累积数之间有很强的相关性[6-9]。花的基因组很小，大约3×105 kb。Kennard等[10]报告了两个与桂花抗霉基因连锁的CsC230 / EcoRI和CsC593 / DraI RFLP标记，抗性基因的遗传距离分别为9.5和17.7 cM。Horejsi等[11]确定了与霜霉病控制基因密切相关的RAPD BC标记，遗传距离为9.9 cM。国华等[12]用亲本L18-10-2（灵芝）和129（抗霉菌）构建了F2代菌株，并获得了与霜霉病抗性基因密切相关的RAPD标记。SBSP18561（具有抗性基因的遗传距离为7.85 cM），并将RAPD标记转换为SCAR标记SSBSP18494。而，上述研究的分子标记与桂花抗性基因之间的遗传连锁距离相对较长，刘妙苗[13]已经构建了8个连锁基团，包括39个标记，全长287.4。cM，平均地图距离为7.37。cM，每个偶联组中的标记数为2至11，桂花树价格共绘制了5个QTL（dm1.1，dm3.1），贡献率为19.6％。振国[14]获得了与ILDM10-4抗性基因（ILdm）相关的三个SSR标记：SSR00772，SSR03529，SSR15321，它们与靶基因的遗传距离分别为3.8、6.0和16.7。cM，标记为SSR00772。传距离小于5 cM，可用于分子标记辅助选择。个标记位于抗霉基因的两侧，为精细定位和克隆奠定了基础。Meng Panqi等人[15]使用BSA方法筛选了AFLP引物P11M70的组合，该引物显示了抗性库与敏感库之间的多态性，抗性库与易感亲本的特异性大小约为304个碱基对。条带，易感库和易感亲本扩增了大约301 bp的特异条带，通过单因素F2检查和对这些条带的分析，将特异片段与晚疫病抗性相关基因相关联。接链接距离为5.22。CM为了克隆霜霉病抗性基因，通常使用抗性基因（RGA）的同源序列作为切入点，并根据疾病抗性基因之间的相似序列设计简并引物。得了从植物基因组获得的扩增产物和抗病基因。切相关，具有很强的同源性[16]。建武等[17]利用反向Northern印迹杂交技术，利用SSH技术构建了与桂花抗白叶枯病后期抗性相关的基因的正负消减文库。过比较分析，分析了正相减文库的单峰EST涉及12个功能类和未知功能的非重复序列片段（单峰EST），比较分析表明逆相减文库是与正相减库相比。调在能量代谢和次级代谢基因中更为突出，表明在导致晚疫病的病原体的压力下，桂花在次级代谢和能量代谢被进一步抑制或破坏。Liu Dajun [18]使用SSH技术构建了抗病的桂花材料，接种了晚疫病，并减去了未表达的差异cDNA文库。
过Northern Northern反向分析，总共获得了48个UniEST阳性克隆，包括8个单子和6个重叠群，发现10个EST片段与同源序列匹配。EST片段可以是一个新的基因，可以实时定量RTPCR，检测和定量RTPCR，结果表明Csa001907和Csa002921可以作为抗病品种桂花抗霉菌的R基因。R基因的大部分是组成型表达的。
时定量RT-PCR实验表明，Csa001907和Csa002921在易感品种中没有下调表达。大军等。[19]发现桂花基因组中有185个与拟南芥抗性枯萎病基因同源的R基因，和两个与Melon的At1和At2抗性基因同源的R基因。过聚类分析将这些基因分为6类，先前已确定Csa001907和Csa002921是桂花的霜霉病R基因，并且在叶片组织中有表达，可以诱导桂花品种的抗病性。培芳等［20］以EF1-α和UBI-ep为内标基因，采用实时荧光定量PCR研究了抗霉过程与相关抗性基因的关系，发现该基因抗PR杂交系HNAU-0023的表达1. MT，PIP，Danj和CAT，MAPK1信号转导因子，TR转录因子，WRKY60，TF和WRKY30呈正调控表达IL112，表明这些基因可以参与一定的时间。桂花过敏性疾病的抵抗力，接种后6小时，GNRF可能不参与对桂花过敏性疾病的抵抗力，痰抑制剂溅射，DDG和H2O2 DPI / DMTU抑制剂霉变，与清水对照组相比，抗病性减毒HNAU-0023的PR-1，PIP和MT防御基因，转录因子TR，TF，WRKY60，WARKY30和MYC是RBOH和MAPK1信号转导表达下调，表明DPI / DMTU / DDG抑制剂可有效下调耐药基因耐药表达的高效调控并证实这些抗性基因参与了对过敏性疾病的抗性，可能是桂花对晚疫病抗性过程中的关键调控基因。大军等[21]分析了SSH-EST代表的基因的功能，发现重组和叶绿体保护机制以及抗氧化胁迫能力与抗性品种的抗性密切相关。疾病由clpb，HSP70，HSP22和SSH-EST代表的脯氨酰顺反异构酶肽组成。R蛋白可以是smHSP，负责跟踪细胞内异常，提供揭示活性氧种类的机制。介辉[22]的qRT-PCR分析结果表明，CsFBXL基因的表达水平在体外叶片中显着降低，这是R介导的防御机制之间关系的主要证据。种48和72小时后，桂花LHAU-0023进行了培养，而在24 h时诱导了自交。经提出了线112的表达被显着调节，表明CsFBXL基因具有组织特异性表达，并且可能负面地调节对桂花霜霉病过敏的抗性。CsFBXL基因弱表达在24 h的ABA和SA诱导下明显表达，而JA的表达低于这两个因素，表明ABA，SA和JA诱导的信号转导的调控可能是由于涉及泛素桂花基因CsFBXL。前，实时PCR已被广泛使用。过将该技术与其他分子生物学技术和实时PCR结合使用，桂花树价格可以定量非常少量的基因表达或DNA拷贝数，荧光标记的核酸化学和寡核苷酸的检测。杂交技术应用的发展可以使定量PCR技术对临床疾病的诊断和治疗有用。SSH是结合PCR抑制和减性杂交的差异基因筛选的快速有效方法，与传统的DD-PCR，SAGE和DNA-RNA。重复性等，广泛用于动植物的发育和分化，微生物基因分型的差异，对疾病的敏感性的差异，病理和正常样品的耐药性和组织差异。管在抗病基因的分子标记中已达到理想的距离，但目前用于桂花传播和繁殖研究的分子标记主要是SSR，AFLP和RAPD标记。了加快桂花新品种的选育进程，扩大桂花遗传资源的遗传多样性，并关注桂花基因的表达和调控，对桂花进行了改良。必要克隆主要的经济性状基因并开发低成本的分子标记。于晚疫病的桂花基因，与晚疫病抗性有关的基因的功能验证相对复杂，研究也相对较少。疫病抗性研究的重点和挑战包括分离与抗桂花有关的基因，使用分子选择方法培育高抗性的桂花品种，打破这些因素效率和成本，并将其应用于实际生产。物学研究的真正目标。
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芽率在15〜22℃[1]。疫病感染以叶子为主。种初期，子叶上先出现黄褐斑，形状不规则，然后病斑逐渐变黄，随着病情的发展，子叶迅速变黄变干，成虫阶段开始出现。子最初是浅绿色水中的浸点。胀后，黄绿色变成浅棕色，呈多边形。期病斑合并成一片，包裹在叶的边缘，整个叶子都干了。严重的情况下，植物的整个叶子都死亡[2]。两个时期都湿润时，在叶的背面上形成灰黑色的霉菌层。气，风和雨的流动是散发霉菌孢子的主要手段。气湿度要求很高，棚内结露，叶子上的水滴是外观的必要因素。子囊可在15°C下经过一个半小时后发芽。动孢子可发芽并侵袭两个小时。
灶形成后，空气湿度与孢子囊的速度和数量成正比。水滴和饱和水分的形式，寄主叶片的组织充满水，病灶的发展加剧，可能发生大的孢子囊，否则孢子囊不能发芽。晚疫病2至3天后发芽能力丧失。适的触发温度在15到24°C之间，低于15°C或高于28°C。难触发。度越高，触发越困难[3]。花品种的发病率存在差异。正常情况下，最易感的品种在低温下具有较早的成熟度和耐受性，而相对抗性的品种则更成熟且具有更高的耐热性。地势和排水良好的土壤适合桂花的生长，同时合理地施用基本肥料以及氮，磷和钾肥，以减少晚疫病的发生。子最经常在环境条件下产生，在明暗交替下，在连续光照下几乎不产生孢子囊[4]。花是一种非常潮湿的疾病，当叶子表面有水滴或水膜时，孢子囊会发芽。[5]表明接种病原体后2 h叶片的水合作用可能会在宿主被细菌入侵后引起疾病和环境湿度。对疾病的发展影响很小。Cohen等[6]发现，孢子囊产生和感染的合适温度为15-20°C。究发现，发病后的天数之间存在抛物线关系孢子囊的症状和累积量，以及活叶片每单位面积产生的孢子囊量大于离体叶片[7]。状发作后的天数与孢子囊和病变区域的累积数之间有很强的相关性[6-9]。花的基因组很小，大约3×105 kb。Kennard等[10]报告了两个与桂花抗霉基因连锁的CsC230 / EcoRI和CsC593 / DraI RFLP标记，抗性基因的遗传距离分别为9.5和17.7 cM。Horejsi等[11]确定了与霜霉病控制基因密切相关的RAPD BC标记，遗传距离为9.9 cM。国华等[12]用亲本L18-10-2（灵芝）和129（抗霉菌）构建了F2代菌株，并获得了与霜霉病抗性基因密切相关的RAPD标记。SBSP18561（具有抗性基因的遗传距离为7.85 cM），并将RAPD标记转换为SCAR标记SSBSP18494。而，上述研究的分子标记与桂花抗性基因之间的遗传连锁距离相对较长，刘妙苗[13]已经构建了8个连锁基团，包括39个标记，全长287.4。cM，平均地图距离为7.37。cM，每个偶联组中的标记数为2至11，桂花树价格共绘制了5个QTL（dm1.1，dm3.1），贡献率为19.6％。振国[14]获得了与ILDM10-4抗性基因（ILdm）相关的三个SSR标记：SSR00772，SSR03529，SSR15321，它们与靶基因的遗传距离分别为3.8、6.0和16.7。cM，标记为SSR00772。传距离小于5 cM，可用于分子标记辅助选择。个标记位于抗霉基因的两侧，为精细定位和克隆奠定了基础。Meng Panqi等人[15]使用BSA方法筛选了AFLP引物P11M70的组合，该引物显示了抗性库与敏感库之间的多态性，抗性库与易感亲本的特异性大小约为304个碱基对。条带，易感库和易感亲本扩增了大约301 bp的特异条带，通过单因素F2检查和对这些条带的分析，将特异片段与晚疫病抗性相关基因相关联。接链接距离为5.22。CM为了克隆霜霉病抗性基因，通常使用抗性基因（RGA）的同源序列作为切入点，并根据疾病抗性基因之间的相似序列设计简并引物。得了从植物基因组获得的扩增产物和抗病基因。切相关，具有很强的同源性[16]。建武等[17]利用反向Northern印迹杂交技术，利用SSH技术构建了与桂花抗白叶枯病后期抗性相关的基因的正负消减文库。过比较分析，分析了正相减文库的单峰EST涉及12个功能类和未知功能的非重复序列片段（单峰EST），比较分析表明逆相减文库是与正相减库相比。调在能量代谢和次级代谢基因中更为突出，表明在导致晚疫病的病原体的压力下，桂花在次级代谢和能量代谢被进一步抑制或破坏。Liu Dajun [18]使用SSH技术构建了抗病的桂花材料，接种了晚疫病，并减去了未表达的差异cDNA文库。
过Northern Northern反向分析，总共获得了48个UniEST阳性克隆，包括8个单子和6个重叠群，发现10个EST片段与同源序列匹配。EST片段可以是一个新的基因，可以实时定量RTPCR，检测和定量RTPCR，结果表明Csa001907和Csa002921可以作为抗病品种桂花抗霉菌的R基因。R基因的大部分是组成型表达的。
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