[桂花树价格]钙和水杨酸对低温桂花播种抗氧化酶同工酶的影响
时间:2019/11/26 6:31:00 浏览量:
以金鹭11号桂花品种为试验材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳研究外源叶面喷施2 mmol / L CaCl2和1 mmol / L SA对叶片抗氧化酶的影响。
花低温播种。的作用。果表明,CaCl2喷施对低浓度处理的桂花幼苗中SOD和POD同工酶带的数量和强度没有明显影响。度,但显着增加了CAT同工酶带的强度。 mmol / L SA显着改善了低温处理的桂花幼苗的SOD1〜SOD4,POD1,POD3 POD6,CAT1和CAT2酶带。示钙和AS通过修饰抗氧化酶同工酶的表达参与了桂花植物低温耐受性的调控。花(Gucumis sativus L.)是中国主要的温室栽培的农作物之一,桂花是易感低温反应的嗜热植物[1],在冬季和春季,常遭受不同程度的侵害。温应力。物生长,光合作用,碳和氮代谢,酶活性和干物质积累具有可变的影响。物中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的存在有助于植物抵抗不利环境造成的活性氧造成的损害。Ca2 +不仅是细胞的结构材料,还是将细胞外信号与细胞内生理和生化反应耦合的第二信使,并且在调节植物的防御和生理反应中起重要作用温度,水和盐的应力[2]。可以提高植物组织或细胞在胁迫下的抗性,可以增加辣椒辣椒幼苗的抗寒性。3]并降低水稻幼苗(Oryza sativa L.)的丙二醛含量[ [4]],以提高茄子幼苗(Sloanum melongena)对膜脂过氧化的抵抗力[5]。杨酸(SA)是植物中常见的一种小分子酚类物质。在诱导植物抗病性,信号转导,激活对植物的过敏反应和系统性抗性中起重要作用。节作用[6]。源SA可能减弱了低温胁迫对桂花植物生长的抑制作用[7]。实验以桂花幼苗为材料,研究外源钙预处理和AS对低温下桂花抗氧化酶同工酶的影响,并探讨其调控机制。和AS对改善温度下的低温耐受性。低温性提供了参考。测试的桂花品种为金鹭十一号(天津绿丰园艺开发公司),购自河南省商丘种子公司。商丘师范学院玻璃温室里种桂花。桂花种子浸泡在热汤中并促进发芽,然后将植物种植在50孔的水井中。
两片叶子和心种植在13厘米×12厘米的软塑料碗中,随机分为三组,每组。三十株植物进行以下处理。验包括以下三种处理:(1)低温:将桂花幼苗放在人工气候箱中进行低温处理,处理条件如下:日/夜温度为15/8黑暗的持续时间是12小时/ 12小时。(2)低温下2 mmol / L的CaCl 2:记录为2 mmol / L Ca 2+的水溶液。对桂花幼苗进行低温处理之前,将CaCl2的水溶液喷雾到叶片表面。(3)低温+ 1 mmol / L SA:记录为1 mmol / L SA溶液,在低温下处理桂花幼苗之前将SA溶液喷洒在叶片上。CaCl2和SA处理:通过叶面喷洒进行预处理,在低温处理开始之前的60、48、36和24小时喷洒4次,处理(1)通过同时喷洒相同体积的水,同时进行。涂刀片的正面和背面。有治疗均添加0.01%Tween。温处理4天后,将在桂花幼苗生长点发育的第二片叶子用于SOD,POD和CAT同工酶的电泳。复测试3次。提取SOD,POD和CAT同工酶的电泳使用相同的酶提取液。0.4 g桂花幼苗叶片,加入1.5 ml磷酸钠缓冲液(0.05 mol / L,pH 7.8,含0.1 mmol / L EDTA和1% PVP),然后在冰浴中均匀研磨。4°C下以12,000 rpm离心20分钟,然后使用上清液获得用于SOD,POD和CAT同工酶电泳的SOD,POD和CAT酶溶液。2同工酶的电泳使用垂直板电泳槽对SOD,POD和CAT聚丙烯酰胺同工酶进行电泳,凝胶浓度为10%,凝胶浓度为50%。
胶的稳定张力为3.75%,凝胶中的稳定张力为90V。胶化后,稳定电压为200V,电泳在3至4小时内完成。SOD同工酶的电泳用邻-(二)茴香胺方法染色[8]。POD同工酶的电泳用醋酸联苯胺法染色[9]。CAT同工酶的电泳添加到分离凝胶中,总体积为0.5%。溶性淀粉通过H2O2-KI方法染色[10]。图1中可以看出,低温处理的桂花幼苗的SOD同工酶显示了五个主要酶带,SOD1,SOD2,SOD3,SOD4和SOD5,其中酶带SOD2,SOD4。SOD5出现较早,属于强带。SOD1酶带发育较晚,略带颜色,属于弱带。低温处理相比,用2 mmol / L Ca2 +预处理的桂花幼苗的SOD同工酶带数量保持不变,其染色程度与低水平处理相似。度。处理1 mmol / L SA会使桂花的SOD1 SOD4显着增加。带,酶带SOD5具有与低温处理相同的着色度。图2可以看出,桂花低温处理的POD同工酶显示6个主要酶带,即POD1,POD2,POD3,POD4,POD5和POD6,其中POD4,POD5和POD6酶出现较早。属于强带:酶带POD1发育较晚,略带颜色,属于弱带。低温处理相比,用2 mmol / L Ca2 +预处理的桂花幼苗的POD同工酶带数量没有变化,其染色程度与低温处理相似。处理1 mmol / L SA明显增加。POD6酶带,POD2酶带的染色程度类似于低温处理。图3中可以看出,低温处理的桂花幼苗的CAT同工酶表现出两个酶带,即CAT1和CAT2。低温处理相比,用2 mmol / L Ca2 +和1 mmol / L SA预处理的桂花幼苗的CAT同工酶带数量保持不变,并且CAT1和CAT2带明显增加,特别是用2 mmol / L的CaCl2预处理。CAT酶带最强。性氧包括超氧阴离子(O-2·),H2O2,羟基自由基(·OH)和单线态氧(1O2)。物中活性氧的水平由抗氧化剂和抗氧化剂的活性来调节。氧化酶SOD以02-2·为底物进行歧化反应,起到0-2·澄清的作用。过其酶促反应产生的H2O2始终是有毒的。H2O2可以被催化并降解有害的H2O。于抗氧化酶(如SOD,POD和CAT)的协同作用,植物中的活性氧可以保持在较低水平,并且可以减少对细胞的损害。于同工酶的功能受代谢的生理调节,所以同工酶分析是识别基因存在和表达的工具[11]。
Ca2 +可以维持细胞壁,细胞膜和膜蛋白的稳定性,并在植物检测,桂花树价格抗寒信号传递和生理反应的产生中发挥重要作用[12-13]。Ca2 +可以增加桂花[14],胡椒[3],番茄(Lycopersicon esculentum Mill。[15],甜瓜(Cucumis melo L。[16]和棉花(Gossypium spp。的SOD。[17]在低温胁迫下,POD,CAT活性降低丙二醛含量,防止膜脂质过氧化并保持膜完整性。该实验中,叶面施用2 mmol / L CaCl2对低温处理的桂花幼苗中SOD和POD同工酶带的数量和强度没有明显影响。显着增加了CAT同工酶带的强度。
些结果表明,Ca 2 +通过修饰抗氧化酶同工酶的表达参与了桂花植物的低温耐受性的调节。芳和他的同事使用了CaCl2的营养液给玉米(Zea mays L.)植株[18],姜秀梅等人将CaCl2叶面喷雾剂应用于辣椒植株,研究结果用10 mmol / L的抗石灰石处理降低了低温造成的损害[19]。晓明等。温下用0.5 mmol / L CaCl2叶面喷洒桂花[14]。以看出,由于材料和植物种类的多样性,Ca2 +处理的方法,浓度,持续时间和持续时间不同,以及低水平处理的强度和持续时间不同。度,这会导致不同的搜索结果。SA被认为是植物响应胁迫而产生的信号分子[20]。SA可以直接作为抗氧化剂来淬灭活性氧或通过激活抗氧化剂的活性来调节氧化还原平衡[21-22]。过增加维生素C和谷胱甘肽的含量,可以减少锰对桂花植物的胁迫。化损伤[23]通过调节抗氧化剂的代谢促进盐胁迫蔬菜作物的生长[24]。
桂花幼苗上进行的马德华和其他低温演习可以使叶片中的游离AS含量增加2.5倍以上,表明AS可能与植物的植物抗性有关。温应力[25]。H2O2的参与下,SA可以通过调节抗氧化酶的活性和质外体蛋白的含量来减少胁迫下植物细胞的结构变化,从而提高植物对寒冷的抵抗力[26]。炜及其同事,常云霞及其同事以及王继中及其同事的研究表明,AS可以增强桂花幼苗中SOD,POD和CAT的稳定性。 温下的苦瓜,桂花树价格叶细胞膜的稳定性和冷害的减弱在该实验中,叶面施用1 mmol / L SA的效果显着低温处理改善了桂花的SOD1〜SOD4,POD1,POD3,POD6,CAT1和CAT2酶带,表明SA参与了抗氧化同工酶表达的调控桂花。之,喷施2 mmol / L的叶面CaCl2可以显着提高低温处理的桂花幼苗CAT同工酶带的强度,喷施1 mmol / L的SAa叶面喷施显着增加了SOD1 SOD4,POD1对桂花的幼苗。POD3〜POD6,CAT1和CAT2酶带表明,钙和AS通过修饰抗氧化酶同工酶的表达参与了桂花植物低温耐受性的调节。
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两片叶子和心种植在13厘米×12厘米的软塑料碗中,随机分为三组,每组。三十株植物进行以下处理。验包括以下三种处理:(1)低温:将桂花幼苗放在人工气候箱中进行低温处理,处理条件如下:日/夜温度为15/8黑暗的持续时间是12小时/ 12小时。(2)低温下2 mmol / L的CaCl 2:记录为2 mmol / L Ca 2+的水溶液。对桂花幼苗进行低温处理之前,将CaCl2的水溶液喷雾到叶片表面。(3)低温+ 1 mmol / L SA:记录为1 mmol / L SA溶液,在低温下处理桂花幼苗之前将SA溶液喷洒在叶片上。CaCl2和SA处理:通过叶面喷洒进行预处理,在低温处理开始之前的60、48、36和24小时喷洒4次,处理(1)通过同时喷洒相同体积的水,同时进行。涂刀片的正面和背面。有治疗均添加0.01%Tween。温处理4天后,将在桂花幼苗生长点发育的第二片叶子用于SOD,POD和CAT同工酶的电泳。复测试3次。提取SOD,POD和CAT同工酶的电泳使用相同的酶提取液。0.4 g桂花幼苗叶片,加入1.5 ml磷酸钠缓冲液(0.05 mol / L,pH 7.8,含0.1 mmol / L EDTA和1% PVP),然后在冰浴中均匀研磨。4°C下以12,000 rpm离心20分钟,然后使用上清液获得用于SOD,POD和CAT同工酶电泳的SOD,POD和CAT酶溶液。2同工酶的电泳使用垂直板电泳槽对SOD,POD和CAT聚丙烯酰胺同工酶进行电泳,凝胶浓度为10%,凝胶浓度为50%。
胶的稳定张力为3.75%,凝胶中的稳定张力为90V。胶化后,稳定电压为200V,电泳在3至4小时内完成。SOD同工酶的电泳用邻-(二)茴香胺方法染色[8]。POD同工酶的电泳用醋酸联苯胺法染色[9]。CAT同工酶的电泳添加到分离凝胶中,总体积为0.5%。溶性淀粉通过H2O2-KI方法染色[10]。图1中可以看出,低温处理的桂花幼苗的SOD同工酶显示了五个主要酶带,SOD1,SOD2,SOD3,SOD4和SOD5,其中酶带SOD2,SOD4。SOD5出现较早,属于强带。SOD1酶带发育较晚,略带颜色,属于弱带。低温处理相比,用2 mmol / L Ca2 +预处理的桂花幼苗的SOD同工酶带数量保持不变,其染色程度与低水平处理相似。度。处理1 mmol / L SA会使桂花的SOD1 SOD4显着增加。带,酶带SOD5具有与低温处理相同的着色度。图2可以看出,桂花低温处理的POD同工酶显示6个主要酶带,即POD1,POD2,POD3,POD4,POD5和POD6,其中POD4,POD5和POD6酶出现较早。属于强带:酶带POD1发育较晚,略带颜色,属于弱带。低温处理相比,用2 mmol / L Ca2 +预处理的桂花幼苗的POD同工酶带数量没有变化,其染色程度与低温处理相似。处理1 mmol / L SA明显增加。POD6酶带,POD2酶带的染色程度类似于低温处理。图3中可以看出,低温处理的桂花幼苗的CAT同工酶表现出两个酶带,即CAT1和CAT2。低温处理相比,用2 mmol / L Ca2 +和1 mmol / L SA预处理的桂花幼苗的CAT同工酶带数量保持不变,并且CAT1和CAT2带明显增加,特别是用2 mmol / L的CaCl2预处理。CAT酶带最强。性氧包括超氧阴离子(O-2·),H2O2,羟基自由基(·OH)和单线态氧(1O2)。物中活性氧的水平由抗氧化剂和抗氧化剂的活性来调节。氧化酶SOD以02-2·为底物进行歧化反应,起到0-2·澄清的作用。过其酶促反应产生的H2O2始终是有毒的。H2O2可以被催化并降解有害的H2O。于抗氧化酶(如SOD,POD和CAT)的协同作用,植物中的活性氧可以保持在较低水平,并且可以减少对细胞的损害。于同工酶的功能受代谢的生理调节,所以同工酶分析是识别基因存在和表达的工具[11]。
Ca2 +可以维持细胞壁,细胞膜和膜蛋白的稳定性,并在植物检测,桂花树价格抗寒信号传递和生理反应的产生中发挥重要作用[12-13]。Ca2 +可以增加桂花[14],胡椒[3],番茄(Lycopersicon esculentum Mill。[15],甜瓜(Cucumis melo L。[16]和棉花(Gossypium spp。的SOD。[17]在低温胁迫下,POD,CAT活性降低丙二醛含量,防止膜脂质过氧化并保持膜完整性。该实验中,叶面施用2 mmol / L CaCl2对低温处理的桂花幼苗中SOD和POD同工酶带的数量和强度没有明显影响。显着增加了CAT同工酶带的强度。
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桂花幼苗上进行的马德华和其他低温演习可以使叶片中的游离AS含量增加2.5倍以上,表明AS可能与植物的植物抗性有关。温应力[25]。H2O2的参与下,SA可以通过调节抗氧化酶的活性和质外体蛋白的含量来减少胁迫下植物细胞的结构变化,从而提高植物对寒冷的抵抗力[26]。炜及其同事,常云霞及其同事以及王继中及其同事的研究表明,AS可以增强桂花幼苗中SOD,POD和CAT的稳定性。 温下的苦瓜,桂花树价格叶细胞膜的稳定性和冷害的减弱在该实验中,叶面施用1 mmol / L SA的效果显着低温处理改善了桂花的SOD1〜SOD4,POD1,POD3,POD6,CAT1和CAT2酶带,表明SA参与了抗氧化同工酶表达的调控桂花。之,喷施2 mmol / L的叶面CaCl2可以显着提高低温处理的桂花幼苗CAT同工酶带的强度,喷施1 mmol / L的SAa叶面喷施显着增加了SOD1 SOD4,POD1对桂花的幼苗。POD3〜POD6,CAT1和CAT2酶带表明,钙和AS通过修饰抗氧化酶同工酶的表达参与了桂花植物低温耐受性的调节。
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