[桂花树价格]互助县温室大花桂花晚疫病的分子鉴定与控制技术
时间：2019/11/29 6:31:16 浏览量：
摘要：为弄清青海省呼竹县大棚桂花白粉病的病原体分类，随机检查种植桂花的日光温室，收集患病植物组织并进行扫描电镜观察和DNA提取白粉病。验结果表明，互助县温室大棚中的白粉病是油菜黄单胞菌，化学防治仍是主要的生产方法，可以与温室中的高温杀菌相结合。海呼竹县位于青藏高原，海拔高，雨量少，昼夜温差大，日照时间长，气候寒冷[1]。于近年来青海省的城市化进程加快，日光温室得到了大规模的发展，温室蔬菜的生产发展非常迅速，其中包括桂花（桂花）。菜种植者因其高产，短收获期和经济效益。粉病是一种经常影响桂花的疾病，也是一种世界性疾病，通常发生在桂花生长的后期，严重影响桂花的生物学性能和质量。清桂花白粉病的分类学现状，为湖珠县桂花白粉病的防治提供进一步的研究，并从分子上鉴定桂花白粉病的病原体。助县的果仁。呼竹县桂花的日光温室中进行了随机调查，观察桂花植物上白粉病的寄生形态并收集白粉病。用扫描电子显微镜观察电子显微镜根据Cook等人的研究。[2]，桂花晚疫病的无性型是固定的，然后在扫描电子显微镜下观察分生孢子和分生孢子的特征以进行分子鉴定。
定。感染白粉病的植物组织切成小块（4 mm×4 mm），并将它们放入装有戊二醛固定剂（浓度为4％，pH 6.8）的小瓶中，贴上标签并注明集合。Pomper。上一步中装入的小瓶放入真空干燥器中以干燥空气，直到叶子的组织完全沉入小瓶底部。c）准备（漂洗，脱水和干燥）。
制备的无性白粉病样品送至西北农林科技大学扫描电子显微镜观察室进行观察和录像。白粉病中提取基因组DNA。菌丝体刮入1.5 mL离心管中，充分研磨，加入600μLCTAB提取物，充分混合，然后在60-65°C水浴中孵育1至2小时。d）取上清液，加入2倍体积的CTAB沉淀溶液，充分混合，在室温下孵育20-30分钟，并在室温下离心15分钟（12，000 rpm）。去上清液，加入350μL的1.2 mol / L NaCl溶液（即DNA裂解液）以溶解沉淀物，然后加入350μL的氯仿并充分混合30秒。心10分钟（12000 rpm），分离各层，将上清液转移至新的微量离心管中，加入0.6至0.8体积的异丙醇，充分混合并在室温下静置40分钟。h）在室温下离心20分钟（12000 rpm），向沉淀中加入500μL和70％乙醇，并充分混合。心5分钟（12，000 rpm），小心倒入上清液并丢弃。复步骤I。室温下干燥后，将DNA溶解在40μL去离子无菌水中，并保存在4°C直至使用。PCR扩增PCR扩增引物参考White等人的方法。[3]并被送到上海生物工程有限公司。于合成。rDNA-ITS的PCR引物序列。
菌主要破坏桂花的叶子，叶柄和茎，但一般不影响果实。同时感染成年植物和幼苗。感染的叶片的正面或背面产生小的圆形白色粉状斑点，即稀疏的菌丝体，然后菌丝继续生长，被感染的部分变成黄色，桂花树价格粉状斑点逐渐发展成大面积白色粉末，边缘不明显，覆盖叶子。片表面呈绿色，褪色且变脆，直至整个叶片死亡。损伤的症状类似于叶子。末层将严重影响光合作用，破坏植物的正常代谢，导致过早衰老和产量下降。该实验中，仅发现了无性状的白粉病，即它仅具有分生孢子，并且病原体的无性状是封闭的胶囊。丝体：菌丝体的叶子在两侧生长，主要在叶子的表面，形成白色的无定形板；分生孢子在电子显微镜下分组，呈圆柱状，桶形，（18-30）μm×（9-17）分生孢子茎直，（35〜80）μm×（5〜10）μm 。桂花粉的rDNA-ITS片段进行了测序，其长度为394×462 bp，平均长度为429 bp，平均GC含量为53.2％。rDNA-ITS序列共有544个位置，其中267个是保守位点，194个是突变位点，145个是最小信息位点，48个是基因座。变位点和信息位点分别代表完整序列。45.2％和33.8％。过比较BLAST同源性，检查测试的序列是否是靶序列。测得的靶序列和参考序列与ClustalX（1.8版）进行比对，删除缺失的位点，不完整的位点和非编码序列的位点，并使用BioEdit手动进行调整，然后在rDNA序列中使用MEGA 4.0。行多重比对分析以消除短序列或间隔序列。用邻近的程序集（NJ）来构建系统树，并使用MEGA 4.0软件[4]基于Kimura-2-Parameter选择两个参数的模型，并进行自举分析。系统树上进行引导（重复引导1000次）以评估分支支持。示了rDNA-ITS的系统发育NJ树（图2）。似度极高，并且自动扩展值为99，这是相同的物种。研究最终证明分子系统发育与形态学鉴定和分类的结果是一致的，也证实了白粉病国际分类理论和方法的合理性[5-8]。粉病菌主要利用菌丝体和分生孢子在病残植物或杂草上越冬，分生孢子萌发的理想温度为20-25°C。
度为16-24°C。菌在气流中扩散，并且在条件允许的情况下被感染并扩大数倍。粉病的病原体将在30°C以上失去活力。据此特性，可以在高温下灭菌，并在药房灭菌。经常盛放白粉病的仓库中，每100平方米混合250克硫酸和500克木屑，然后播种，整夜点燃和抽烟。白粉病发作之前和初期，用45％百菌清烟民吸烟。现白粉病后，应使用含50％硫的悬浮剂的250％至300倍溶液，15％防锈剂和可湿性粉剂溶液的1500倍，特氟龙（氟康唑）可湿性粉剂的30％ ），溶液的500至2，000倍等也可以使用杀菌剂溶液，高锰酸钾溶液600到800倍，每两周喷一次，连续喷四次以及叶面喷施磷酸盐和钾盐溶液。该试验中，通过分子手段确定了互助县温室大棚中的寄生桔梗白粉病是黄豆。前，控制方法仍主要是化学药品，并结合了诸如高温棚屋之类的物理措施。
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定。感染白粉病的植物组织切成小块（4 mm×4 mm），并将它们放入装有戊二醛固定剂（浓度为4％，pH 6.8）的小瓶中，贴上标签并注明集合。Pomper。上一步中装入的小瓶放入真空干燥器中以干燥空气，直到叶子的组织完全沉入小瓶底部。c）准备（漂洗，脱水和干燥）。
制备的无性白粉病样品送至西北农林科技大学扫描电子显微镜观察室进行观察和录像。白粉病中提取基因组DNA。菌丝体刮入1.5 mL离心管中，充分研磨，加入600μLCTAB提取物，充分混合，然后在60-65°C水浴中孵育1至2小时。d）取上清液，加入2倍体积的CTAB沉淀溶液，充分混合，在室温下孵育20-30分钟，并在室温下离心15分钟（12，000 rpm）。去上清液，加入350μL的1.2 mol / L NaCl溶液（即DNA裂解液）以溶解沉淀物，然后加入350μL的氯仿并充分混合30秒。心10分钟（12000 rpm），分离各层，将上清液转移至新的微量离心管中，加入0.6至0.8体积的异丙醇，充分混合并在室温下静置40分钟。h）在室温下离心20分钟（12000 rpm），向沉淀中加入500μL和70％乙醇，并充分混合。心5分钟（12，000 rpm），小心倒入上清液并丢弃。复步骤I。室温下干燥后，将DNA溶解在40μL去离子无菌水中，并保存在4°C直至使用。PCR扩增PCR扩增引物参考White等人的方法。[3]并被送到上海生物工程有限公司。于合成。rDNA-ITS的PCR引物序列。
菌主要破坏桂花的叶子，叶柄和茎，但一般不影响果实。同时感染成年植物和幼苗。感染的叶片的正面或背面产生小的圆形白色粉状斑点，即稀疏的菌丝体，然后菌丝继续生长，被感染的部分变成黄色，桂花树价格粉状斑点逐渐发展成大面积白色粉末，边缘不明显，覆盖叶子。片表面呈绿色，褪色且变脆，直至整个叶片死亡。损伤的症状类似于叶子。末层将严重影响光合作用，破坏植物的正常代谢，导致过早衰老和产量下降。该实验中，仅发现了无性状的白粉病，即它仅具有分生孢子，并且病原体的无性状是封闭的胶囊。丝体：菌丝体的叶子在两侧生长，主要在叶子的表面，形成白色的无定形板；分生孢子在电子显微镜下分组，呈圆柱状，桶形，（18-30）μm×（9-17）分生孢子茎直，（35〜80）μm×（5〜10）μm 。桂花粉的rDNA-ITS片段进行了测序，其长度为394×462 bp，平均长度为429 bp，平均GC含量为53.2％。rDNA-ITS序列共有544个位置，其中267个是保守位点，194个是突变位点，145个是最小信息位点，48个是基因座。变位点和信息位点分别代表完整序列。45.2％和33.8％。过比较BLAST同源性，检查测试的序列是否是靶序列。测得的靶序列和参考序列与ClustalX（1.8版）进行比对，删除缺失的位点，不完整的位点和非编码序列的位点，并使用BioEdit手动进行调整，然后在rDNA序列中使用MEGA 4.0。行多重比对分析以消除短序列或间隔序列。用邻近的程序集（NJ）来构建系统树，并使用MEGA 4.0软件[4]基于Kimura-2-Parameter选择两个参数的模型，并进行自举分析。系统树上进行引导（重复引导1000次）以评估分支支持。示了rDNA-ITS的系统发育NJ树（图2）。似度极高，并且自动扩展值为99，这是相同的物种。研究最终证明分子系统发育与形态学鉴定和分类的结果是一致的，也证实了白粉病国际分类理论和方法的合理性[5-8]。粉病菌主要利用菌丝体和分生孢子在病残植物或杂草上越冬，分生孢子萌发的理想温度为20-25°C。
度为16-24°C。菌在气流中扩散，并且在条件允许的情况下被感染并扩大数倍。粉病的病原体将在30°C以上失去活力。据此特性，可以在高温下灭菌，并在药房灭菌。经常盛放白粉病的仓库中，每100平方米混合250克硫酸和500克木屑，然后播种，整夜点燃和抽烟。白粉病发作之前和初期，用45％百菌清烟民吸烟。现白粉病后，应使用含50％硫的悬浮剂的250％至300倍溶液，15％防锈剂和可湿性粉剂溶液的1500倍，特氟龙（氟康唑）可湿性粉剂的30％ ），溶液的500至2，000倍等也可以使用杀菌剂溶液，高锰酸钾溶液600到800倍，每两周喷一次，连续喷四次以及叶面喷施磷酸盐和钾盐溶液。该试验中，通过分子手段确定了互助县温室大棚中的寄生桔梗白粉病是黄豆。前，控制方法仍主要是化学药品，并结合了诸如高温棚屋之类的物理措施。
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