[桂花树价格]桂花晚疫病菌Bs18的筛选与鉴定

　　为了筛选对桂花白粉病具有拮抗作用的生物防治菌株，从温室土壤样品中分离出692个细菌菌株。过内部抗菌斑筛选和盆栽控制实验，筛选出菌株Bs18对桂花晚疫病和桂花具有良好的防治效果。池达到82.22％。过其形态特征，生理生化特征和16S rDNA测序分析，鉴定出Bs18菌株为解淀粉芽孢杆菌。花霉菌（黄瓜白粉病）是典型的生产性空气传播疾病之一，在春季和秋季的保护区和空地都可能发生。病具有以下特征：潜伏期短，流行病学高和经常再感染：如果不及时控制，白粉病会在短时间内覆盖叶子，并因缺乏光合作用而死亡，这将导致严重的经济损失。前，化学试剂（唑类杀真菌剂）主要用于预防和控制桂花中的白粉病，但是随着化学试剂的长期使用，白粉病对化学试剂的抗性增加了。

　　年又一年，化学试剂该地区的农药残留直接威胁人类健康。内外相关研究表明，桂花树价格生物防治微生物对桂花白粉病也具有良好的抑制作用，但相关研究尚处于实验室研究阶段。项研究的目的是分离和筛选对桂花霜霉病具有明显防治效果的生物防治菌株，为控制桂花霉菌的安全性和生产服务提供优良的生物学资源。业。壤样品：28个样品取自天津西青，静海和武清的桂花温室的根际土壤。原体：葫芦科，灰葡萄孢。

　　壤细菌的分离：称取10 g土壤样品，将其添加到装有100 ml水的锥形瓶中，并摇晃（160 rpm）30分钟。土壤悬浮液连续稀释至10-1至10-6，然后将100μL的10-4和10-5的每种稀释浓度分别接种在LB板上，并在37°C下生长24小时。LB的倾斜表面移出不同形式的单菌落，在37°C下培养24小时，然后在4°C的冰箱中保存。抗细菌的实验室筛选：分离的细菌菌株的抗菌作用。葡萄孢菌当对照中充满斑块时测量菌落的生长直径，并计算菌株的拮抗率。抗率大于60％的菌株储存在20％甘油冷冻保存管中。菌发酵细菌拮抗剂的制备：将具有良好拮抗作用的细菌菌株转移至LB平板上以使其活化24小时，然后将其接种到LB液体培养基中，在恒温搅拌器上培养48小时（28°C，桂花树价格160 rpm）并准备细菌细菌含量为108 cfu / mL的细菌细胞发酵原液。栽植物的对照试验：将桂花（金油3号）播种在营养钵中，然后将细菌发酵原液的2倍稀释液喷洒到桂花的叶片上。
　　初，然后是一周后的第二次。每10株植物处理并重复3次，用水喷雾作为对照。二次喷雾后一周，评估并研究了桂花中白粉病的发生率，并计算了拮抗细菌的防治效果。态识别可以观察形态，颜色，轮廓，透明度，不规则性等。

　　落和革兰氏染色用于观察细菌的形态。菌的生理生化特征的生理生化鉴定（革兰氏染色，孢子染色，柠檬酸盐利用等）以供分析，请参阅《植物病原细菌鉴定指南》（第三版）3-6。s rDNA的分子鉴定用裂解法从菌株中提取基因组DNA具有良好的控制效果，并使用引物对序列原核生物的通用引物进行PCR扩增。存的16S rDNA。PCR反应系统（50μL）如下：1μL模板DNA，25μLTaq缓冲液，各1μL的PO和P1引物，并在50μL中添加双蒸馏水。
　　PCR反应的时间表是：94℃持续5分钟，94℃持续30秒，51℃持续30秒，72℃持续30秒，30个循环，72℃持续10分钟。扩增产物进行测序后，将该序列与通过Blast程序在GenBank中记录的16S rDNA序列进行比较。过土壤稀释法从收集的28个土壤样品中分离出692株细菌。灰葡萄孢（Botrytis cinerea）为靶标细菌，通过板内平板培养筛选方法获得拮抗水平大于60％的26个菌株。
　　通用引物对16S rDNA的保守序列进行扩增，并对Bs18菌株进行rDNA分子鉴定，产物长度约为1.3 kb。NCBI上对该序列进行BLAST同源性比较。果表明Bs18菌株与多种淀粉菌株Bacillus 16S rDNA核苷酸序列的同源性为100％。合生理生化鉴定，Bs18菌株为解淀粉芽孢杆菌。着生物防治细菌的发展和应用，桂花白粉病的生物防治受到越来越多的关注。
　　外进行的相关研究表明，寄生真菌quisgualisces Ampelomyces quisgualisces，黄萎病菌Verticillium lecanii，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 7和8对桂花白粉病具有一定的防治作用。花叶枯病生物防治的国家研究也在不断增加：陆秀云等[9]从土壤中分离出XJT27菌株，其田间防治效果为79.02％。Chen Wenshu等[10]研究表明，放线菌C2发酵对桂花白粉病的防治效果达到72.14％；对桂花白粉病的防治效果达72.14％。小英等人进行的11项研究表明，内源性LP5细菌对桂花中oid的控制作用为79.4％。量研究表明，应用生物控制菌株控制桂花霜霉病是可行的途径，但相关研究仍处于早期阶段：如何将这些菌株应用于尽快的领域是未来研究的中心。研究从温室中的桂花根际土壤中分离出解淀粉芽孢杆菌Bs18，其对桂花霜霉病的防护率达到82.22％。粉芽孢杆菌具有以下特点：抗菌谱广，活性高，抗逆性强，生长快，稳定性好，非常适合大规模生产及其作为生物防治细菌的应用前景广阔发展。前，对发酵条件，利用浓度和菌株作用机理的研究正在进行中，为广泛的菌株生产和应用提供了理论依据和基础。
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