[桂花树价格]桂花菌丝体蛋白对小麦种子萌发及抗旱性的影响
时间:2019/12/4 6:32:38 浏览量:
通过在液体发酵中培养获得桂花的菌丝体,并通过反复的冷冻/解冻方法获得菌丝体蛋白。究了不同浓度的菌丝体蛋白对小麦种子萌发和生长的影响。果表明,桂花菌丝体蛋白可以显着促进种子萌发和幼苗生长,其功能是激活蛋白。同浓度的菌丝蛋白对小麦幼苗的萌发和生长具有不同的启动子作用。中,0.625 mg / mL的菌丝体蛋白对小麦种子的萌发和生长具有最明显的促进作用:种子发芽率从70%提高到85%;与对照组相比,第5、7、9和11天的幼苗播种高度分别提高了25%,桂花树价格50%,58%和45%。0.625 mg / mL菌丝体蛋白处理过的小麦对小麦干燥的诱导也最好。对照相比,幼苗成活率提高了21.28个百分点,抗逆性提高了19.48个百分点,幼苗的整体抗旱性系数从35提高了, 45至55.88。照是对照的1.57倍,根活力是对照的2倍。活剂是从真菌中分离出来的具有引发功能的新型蛋白质。白质的激活主要激活植物的分子免疫系统,提高其自身免疫性,刺激植物的一系列代谢调节,促进植物的根,茎,叶和叶绿素含量的增长。植,从而提高农作物产量[1]。
传芯片分析的结果表明,用激活蛋白处理后,水稻中与防御和生长相关的一系列基因被正调控[2]。白质活化可以诱导许多植物的系统抗性,促进植物生长并改善作物品质。化蛋白是:链格孢属,根瘤菌,曲霉,Magnaportegrisea,青霉,木霉,镰刀镰刀菌。发现了许多其他真菌[3],来自不同来源的蛋白质引发剂的理化性质略有不同,但生物学活性相似。了进一步探索具有中国自主知识产权的新型活化蛋白,本研究以桂花为测试材料,通过液体发酵获得菌丝体,在低温下提取蛋白,分析了生物学功能。花蘑菇由沉阳农业大学植物保护学院生物农药实验室提供。心机,恒温水浴,电子秤,旋转蒸发仪,真空干燥箱,培养皿(直径90毫米),自动恒温器。接种针取一些桂花褐斑菌丝,将其接种在PDA的固体培养基上,将其放在7°C的培养箱中7天,然后在培养基中培养。200mLYPD的液体。温度恒定搅拌下于28°C生长4-5天,通过真空过滤收集菌丝体,用两次蒸馏水洗涤几次,并在低温下干燥。10克木耳桂花菌丝体,用喷雾器压碎,放入烧杯中数次,于-25°C冻融两次,于12,000 rpm离心15分钟。速冷冻离心机,收集上清液,冻干并保存。在-20°C的冰箱中使用蛋白质含量通过考马斯亮蓝法测定。
准蛋白质曲线:取牛血清白蛋白,以1 mg / mL的浓度制备,然后用蒸馏水以0.2、0.4、0.6的浓度稀释, 0.8和1.0 mg / mL。确地将每个试管溶液0.1 ml移入带有盖的试管中,加入5 ml考马斯亮蓝G-250试剂,充分混合,静置2分钟,然后在595nm下测量吸光度。丝蛋白的测定:称量菌丝蛋白,并用蒸馏水配制浓度梯度。取0.1毫升上述溶液,并将其放入20毫升加盖的试管中,加入5毫升考马斯亮蓝G-250试剂。慢并定期将溶液混合在试管中。置2分钟后,测量595 nm处的吸光度。全麦种子,消毒后将其浸入不同浓度的菌丝体蛋白中8小时,然后每次处理将20种种子放入滤纸的皮氏培养皿中,以蒸馏水为对照,并记录下12小时后发芽率。9、9和11天测量植物的高度。健康饱满的小麦种子,消毒后将其浸入不同浓度的菌丝体蛋白中8小时,每次处理时将20粒种子放入衬有滤纸的培养皿中,然后加入60 g沙子。英以蒸馏水为对照,并及时完成注水。麦生长14天后,供水中断并开始干旱,当70%的植物枯萎且叶子被针叶包裹后,它们会重新补水。水后,它们会重新补水。1天后,计算幼苗存活率和叶片抗性。
系数。种处理重复3次。体抗旱性=(幼苗成活率+叶片抗性)×100/2。化三苯四唑(TTC)方法用于确定根活力。
取0.5 g根样品,将其放在一个小烧杯中,加入10 ml 0.4%TTC溶液和66 mmol / L pH7.0磷酸盐缓冲液的等效混合物,浸入完全扎根于溶液中,并在黑暗中于37°C孵育。1-3小时后,添加2 ml 1 mol / L硫酸以终止反应。时,进行空白试验:首先加入硫酸,然后加入根样品,其他操作与上述相同。后取出根,用3〜4 ml乙酸乙酯或丙酮和少量石英砂干燥,然后在研钵中研磨以吸收三苯基甲am。 红色提取物转移至试管中,用少量乙酸乙酯或丙酮洗涤残留物三遍,然后转移至试管中,然后加入乙酸乙酯或丙酮,总共得到10毫升,然后使用分光光度计在485 nm的波长下比较颜色。试参考以测量吸光度并检查TTC降低的标准曲线。原强度TTC =还原量TTC(g)/ [根的重量(g)×持续时间(h)]。准曲线的制备:将0.2 ml的0.4%TTC溶液放入10 ml的容量瓶中,加入少许Na2S2O4粉末并立即振摇以获得红色三苯基甲am,然后用用乙酸乙酯或丙酮充分搅拌。
后将此溶液分别放入10 ml容量瓶中的0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 ml中,并用乙酸乙酯定容至25 ml。有三苯基甲am的,50、100、150、200μg/ ml。准颜色系列使用空白作为参考,并测量485 nm波长处的吸光度。图1中可以看出,与对照相比,桂花菌丝体蛋白可以极大地促进小麦种子的萌发。同浓度的菌丝蛋白浸润的小麦种子的发芽率高于对照,其中0.625 mg / ml的菌丝蛋白对小麦的生长和发芽率影响最大。子从70%上升到85%。
苗生长强烈,株高显着高于对照。中,0.625 mg / mL的菌丝体蛋白对小麦种子的生长影响最大,与对照相比,在第5、7、9和11天处理的幼苗高度增加。别。25%,5%,桂花树价格58%,45%。麦遭受干旱胁迫后,对照组中的大多数小麦都枯萎了,而用菌丝蛋白处理的小麦生长良好并保持直立。中,0.625 mg / ml的菌丝体蛋白对小麦的抗旱性具有最显着的影响:补液后,用0.625 mg的菌丝体蛋白处理的小麦幼苗的存活率/ ml比对照组高21.28点,比对照组高19.58点。苗的总抗旱系数从35.45增加到55.88,是对照的1.57倍,根部活力是对照的两倍(表1),表明桂花叶片菌丝体的菌丝体蛋白增强了小麦的抗旱性。
测试的结果表明,桂花菌丝体的菌丝体蛋白促进了小麦种子的萌发和生长,并起到活化该蛋白的作用。0.625 mg / mL菌丝体蛋白处理的小麦种子生长最佳,提高了小麦的抗旱性。实验仅研究了一种小麦,激活蛋白的应用非常广泛。此,可以更深入地研究其对其他农作物(如桂花,番茄等)的影响。
实验研究了活化蛋白对小麦幼苗发芽和生长的影响,仅证实了其在促进发芽,幼苗生长和抗旱性方面的有效性。花菌丝体的菌丝体菌丝体蛋白仅为粗蛋白,有必要进一步分离纯化出活性物质,以作进一步研究。
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桂花树价格 http://m.guihua99.net/m/
传芯片分析的结果表明,用激活蛋白处理后,水稻中与防御和生长相关的一系列基因被正调控[2]。白质活化可以诱导许多植物的系统抗性,促进植物生长并改善作物品质。化蛋白是:链格孢属,根瘤菌,曲霉,Magnaportegrisea,青霉,木霉,镰刀镰刀菌。发现了许多其他真菌[3],来自不同来源的蛋白质引发剂的理化性质略有不同,但生物学活性相似。了进一步探索具有中国自主知识产权的新型活化蛋白,本研究以桂花为测试材料,通过液体发酵获得菌丝体,在低温下提取蛋白,分析了生物学功能。花蘑菇由沉阳农业大学植物保护学院生物农药实验室提供。心机,恒温水浴,电子秤,旋转蒸发仪,真空干燥箱,培养皿(直径90毫米),自动恒温器。接种针取一些桂花褐斑菌丝,将其接种在PDA的固体培养基上,将其放在7°C的培养箱中7天,然后在培养基中培养。200mLYPD的液体。温度恒定搅拌下于28°C生长4-5天,通过真空过滤收集菌丝体,用两次蒸馏水洗涤几次,并在低温下干燥。10克木耳桂花菌丝体,用喷雾器压碎,放入烧杯中数次,于-25°C冻融两次,于12,000 rpm离心15分钟。速冷冻离心机,收集上清液,冻干并保存。在-20°C的冰箱中使用蛋白质含量通过考马斯亮蓝法测定。
准蛋白质曲线:取牛血清白蛋白,以1 mg / mL的浓度制备,然后用蒸馏水以0.2、0.4、0.6的浓度稀释, 0.8和1.0 mg / mL。确地将每个试管溶液0.1 ml移入带有盖的试管中,加入5 ml考马斯亮蓝G-250试剂,充分混合,静置2分钟,然后在595nm下测量吸光度。丝蛋白的测定:称量菌丝蛋白,并用蒸馏水配制浓度梯度。取0.1毫升上述溶液,并将其放入20毫升加盖的试管中,加入5毫升考马斯亮蓝G-250试剂。慢并定期将溶液混合在试管中。置2分钟后,测量595 nm处的吸光度。全麦种子,消毒后将其浸入不同浓度的菌丝体蛋白中8小时,然后每次处理将20种种子放入滤纸的皮氏培养皿中,以蒸馏水为对照,并记录下12小时后发芽率。9、9和11天测量植物的高度。健康饱满的小麦种子,消毒后将其浸入不同浓度的菌丝体蛋白中8小时,每次处理时将20粒种子放入衬有滤纸的培养皿中,然后加入60 g沙子。英以蒸馏水为对照,并及时完成注水。麦生长14天后,供水中断并开始干旱,当70%的植物枯萎且叶子被针叶包裹后,它们会重新补水。水后,它们会重新补水。1天后,计算幼苗存活率和叶片抗性。
系数。种处理重复3次。体抗旱性=(幼苗成活率+叶片抗性)×100/2。化三苯四唑(TTC)方法用于确定根活力。
取0.5 g根样品,将其放在一个小烧杯中,加入10 ml 0.4%TTC溶液和66 mmol / L pH7.0磷酸盐缓冲液的等效混合物,浸入完全扎根于溶液中,并在黑暗中于37°C孵育。1-3小时后,添加2 ml 1 mol / L硫酸以终止反应。时,进行空白试验:首先加入硫酸,然后加入根样品,其他操作与上述相同。后取出根,用3〜4 ml乙酸乙酯或丙酮和少量石英砂干燥,然后在研钵中研磨以吸收三苯基甲am。 红色提取物转移至试管中,用少量乙酸乙酯或丙酮洗涤残留物三遍,然后转移至试管中,然后加入乙酸乙酯或丙酮,总共得到10毫升,然后使用分光光度计在485 nm的波长下比较颜色。试参考以测量吸光度并检查TTC降低的标准曲线。原强度TTC =还原量TTC(g)/ [根的重量(g)×持续时间(h)]。准曲线的制备:将0.2 ml的0.4%TTC溶液放入10 ml的容量瓶中,加入少许Na2S2O4粉末并立即振摇以获得红色三苯基甲am,然后用用乙酸乙酯或丙酮充分搅拌。
后将此溶液分别放入10 ml容量瓶中的0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 ml中,并用乙酸乙酯定容至25 ml。有三苯基甲am的,50、100、150、200μg/ ml。准颜色系列使用空白作为参考,并测量485 nm波长处的吸光度。图1中可以看出,与对照相比,桂花菌丝体蛋白可以极大地促进小麦种子的萌发。同浓度的菌丝蛋白浸润的小麦种子的发芽率高于对照,其中0.625 mg / ml的菌丝蛋白对小麦的生长和发芽率影响最大。子从70%上升到85%。
苗生长强烈,株高显着高于对照。中,0.625 mg / mL的菌丝体蛋白对小麦种子的生长影响最大,与对照相比,在第5、7、9和11天处理的幼苗高度增加。别。25%,5%,桂花树价格58%,45%。麦遭受干旱胁迫后,对照组中的大多数小麦都枯萎了,而用菌丝蛋白处理的小麦生长良好并保持直立。中,0.625 mg / ml的菌丝体蛋白对小麦的抗旱性具有最显着的影响:补液后,用0.625 mg的菌丝体蛋白处理的小麦幼苗的存活率/ ml比对照组高21.28点,比对照组高19.58点。苗的总抗旱系数从35.45增加到55.88,是对照的1.57倍,根部活力是对照的两倍(表1),表明桂花叶片菌丝体的菌丝体蛋白增强了小麦的抗旱性。
测试的结果表明,桂花菌丝体的菌丝体蛋白促进了小麦种子的萌发和生长,并起到活化该蛋白的作用。0.625 mg / mL菌丝体蛋白处理的小麦种子生长最佳,提高了小麦的抗旱性。实验仅研究了一种小麦,激活蛋白的应用非常广泛。此,可以更深入地研究其对其他农作物(如桂花,番茄等)的影响。
实验研究了活化蛋白对小麦幼苗发芽和生长的影响,仅证实了其在促进发芽,幼苗生长和抗旱性方面的有效性。花菌丝体的菌丝体菌丝体蛋白仅为粗蛋白,有必要进一步分离纯化出活性物质,以作进一步研究。
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