桂花颜色突变体的连锁遗传和分子标记研究

　　正常的叶片（绿色）和叶片颜色突变（黄色）材料桂花被用作亲本，以准备第一代（F1），杂交（BC）和F'分离种群。

　　其用作测试材料。究了桂花叶片颜色突变的遗传规律。时，分子标记技术已被用来筛选与叶色突变基因紧密相关的分子标记。F1，BC1和F2的后代中绿叶植物与黄叶植物的比率的统计数据表明，叶子的绿色完全高于黄色，并且叶子的黄色由隐性基因控制。用AFLP技术和BSA方法，筛选了一对引物，以显示绿色和黄色叶子的亲本​​以及绿色和黄色叶子的库中的多态性。
　　叶的父母和绿叶池在200 bp处有一个特定的条带，而黄叶的父母和黄叶池则没有条带。F2代的验证表明，识别结果的符合率达到100％。色突变是高等植物的特征突变。以通过自然诱导，物理和化学诱变以及组织培养来诱导叶片颜色突变。体内叶绿素缺乏引起的这种类型的叶色突变几乎可以在所有农作物中发生。究叶片颜色的变化具有重要的理论意义。是研究一系列生理代谢过程（如植物光合作用，光形态发生，激素生理和抗病机制）的理想材料，与此同时，该突变体的用途也可以扩展到功能基因组学，可以更直接和有效地研究功能基因。

　　色的变化对于繁殖也具有重要的应用价值。于叶色突变性状很容易识别，通常在苗期表达，因此不可能使用叶色突变体作为标记来选择优良的品种和杂交。决定种子的纯度。
　　播种期也可以消除被外源花粉污染的种子和假杂种：因为一些叶色突变体具有出色的特殊性状，除了用作杂交标记性状外，还可以用于植物的遗传改良。作物的遗传选择提供了极好的遗传物质资源。绿素缺失突变的研究开始较早，并于1930年代报道。外已报道了八种桂花幼苗的非致死叶色突变体：g.lg-1，lg-2，v，桂花树价格vvi，yc-1，yc-2，yp。中国还发现了四个非致命性的桂花幼苗。者在该单元中发现了一个高世代自交系的黄色叶片突变体。交后发现，该系幼苗的所有子叶均为黄色：真叶的颜色随着生长逐渐变绿，但与其他绿色植物相比，它们的叶更多清澈：桂花的果实也出现黄绿色。了阐明突变体的遗传规律，笔者以叶片菌株和正常突变体菌株及其杂种和回交后代作为测试菌株。过观察叶片的颜色，研究并仔细检查了突变体的遗传规律。

　　分子标记旨在为将来充分利用此突变性状提供理论依据。实验在天津科润桂花研究院的生物技术实验室完成。用的叶色和叶色的突变材料是由天津科润桂花研究所的研究员陈正武捐赠的。
　　代种群叶色分离的制定和统计分析以正常的叶子着色和叶突变材料为亲本，以准备F1后代，回交1和F1的种群。察并记录每个后代叶片的颜色分离，并通过x2检验进行显着分析以验证遗传规律。花叶片颜色突变基因的分子标记分析：分子标记分析桂花基因组DNA的提取：采用CTAB法。DNA池的构建：从单株F2中提取DNA后，随机提取10个正常叶片颜色（绿色）和突变体（黄色）的DNA，并等量混合以构建DNA池绿色和黄色为分子标记。析。AFLP分析：参考Vos等人的方法。用内切酶Mse 1和EcoR 12消化桂花的基因组DNA：扩增前引物使用不含选择性碱基的MOO和EOO。择性扩增完成后，将扩增的产物通过在5％变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳进行分离，并通过银染进行染色。子标记的筛选：亲本池（绿色和黄色叶子的父母）和叶色池（绿色和黄色叶子的池）的AFLP扩增，以及在池之间产生相同多态性的引物组合最初认为亲本和叶片颜色库与桂花有关。

　　片颜色突变基因具有结合关系，然后使用引物组合扩增单个植物F2以进一步确认该关系选择的标记物与靶基因之间的结合性。叶片颜色和叶片颜色突变体材料为亲本（图1），通过回交获得了F1代，观察到F1代植物是绿色的，并且在整个植物的上方和下方都没有黄色的叶子，这表明突变体材料在突变体材料中。制叶色的基因受核基因控制，不受细胞质遗传的影响。子的绿色占主导地位的黄色。算了166株回交单株植物的叶色，其中81株为绿叶，85株为黄叶。叶与黄叶的比率对应于1：1的分离比率（图2）。时，在F2代的81株单株中，58片绿叶和23片黄叶显示出明显的分离。检查×2之后，它基本上遵循了3：1的分离比，这表明桂花的绿色完全胜于叶子的黄色。卵黄由一对隐性基因控制（表1，图3）。绿叶亲本，黄叶亲本和绿叶池塘以及黄叶池塘的亲本用作初步选择引物的测试材料。为9.15％：其中一种引物E24 / M70在亲本与绿叶池和黄叶池之间具有相同的多态性（图4）。用引物组E2 / M70扩增单代F2植物。电泳分离的结果可以看出，在所有带有绿叶的植物中目标条带均被扩增，但是在带有黄叶的植物中未发现特定的条带（图5）。验证两个后代中，E24 / M70标记与F2代的符合率高达100％，表明该标记与叶色基因紧密相关。据国内外文献，桂花幼苗叶片颜色的非致命突变体有13个，其中国外报道的有8个，全国报道的有4个。据特征的描述，作者发现的突变体的叶子颜色在整个生长期为浅黄绿色，结果也是黄色，这与上面报道的突变体不同。过这项研究，我们对这种突变性状的遗传规律有了深刻的了解，这些性状完全以绿色和黄色为主，叶片中的黄色由一对隐性基因控制。为这种叶子颜色突变的特性非常容易识别，所以它在苗期就表达了。果将此叶色突变体用作精细选择和交叉选择的标记，则可以确定种子的纯度。于叶子的卵黄是由隐性基因控制的，因此当用作雌性亲本时，只能用作形态标记来检测种子的纯度。用黄叶作为母本的缺点是种子产量低。前，作者正在使用具有杂合叶色基因座的优良材料作为母本进行进一步的选种研究。旦选择了满足育种目标的新品种，种子就会具有独特的叶子颜色标记，这一点很重要。用价值。
　　本文转载自
　　桂花树价格 http://m.guihua99.net/m/