内生蘑菇的筛选提高玉米幼苗的抗旱性
时间：2020/1/13 6:30:52 浏览量：
在室内盆栽条件下，从桂花和小麦组织中分离出20种内生真菌接种桂花幼苗，并用8％的PEG-6000模拟干旱胁迫。较了正常浇水和干旱条件下桂花植物的生长差异。果表明，桂皮，藜麦和甜菜碱对桂花幼苗的生长促进作用要好于淫羊and和链格孢属，其中包括LW29（Cladosporium sp。JN16（Cladosporium sp。），NY15（Chaetomium sp。和YC1（Beauveria sp。这四个菌株对桂花幼苗具有明显的生长作用，可以提高桂花植物的抗旱性。霉属，木霉属来源于小麦，对桂花幼苗的生长有一定影响，但效果不如NY15，LW29，YC1和JN16。生的大多数植物已显示具有内生寄生虫。些内生菌可以促进植物生长和组织分化，同时增加植物对一系列生物和非生物胁迫的抗性，但不会造成植物损害[1]。生真菌在植物中相对丰富，广泛分布于半螺旋藻，隐孢子虫，毛竹和毛竹[2，3]。生真菌是植物组织和植物共生真菌的主要成分。们存在于多种类型的组织中，例如植物的根，茎和叶，可以提高植物对生物和非生物胁迫的适应性，例如有效控制植物病虫害[4]。
]，促进植物生长[5]，提高植物抗逆性[6，7]。旱是限制作物生长的主要因素之一，严重影响作物的新陈代谢和单产。生真菌可以促进宿主植物在恶劣环境中的存活，与植物相互作用后，可以提高植物对非生物胁迫的耐受性，特别是抗旱性。究表明，内生真菌可以通过影响植物的形态发育以及对胁迫的生理和生化反应来诱导对宿主干燥的抗性[8]。
生真菌还可以通过产生生长素来提高植物对干旱胁迫的反应能力，同时抑制钠离子的吸收或阻止其迁移[10]。盐胁迫和干旱条件下，内生真菌通过促进植物吸收钾和钙等营养物质并促进营养平衡来提高宿主植物的耐受性[11]。花是中国播种面积最大，单产最高的作物，在确保国家粮食安全中发挥着重要作用[12]。旱是影响桂花产量的主要因素之一，特别是对桂花期的影响更为严重，会导致苗木生长缓慢，成活率低，导致不同程度的减产，在严重的情况下可能会导致灭绝[13]。
往的研究主要集中在桂花的抗旱机理和抗旱品种的选择上。生真菌的使用为提高桂花的抗旱性提供了新思路。本研究中，选择了从桂花和小麦组织中分离的20种内生真菌接种桂花植物，并使用8％PEG-6000模拟干旱胁迫。析了正常水分和干旱胁迫下桂花植株生长的差异，滤出内生真菌，可以提高桂花的抗旱性，为发展提供重要的微生物资源。及内生真菌在农业生产中的用途。桂花叶片，根和小麦叶片中分离出内生真菌，共计20个菌株，具体名称和来源列于表1。择合适的菌株并接种在9厘米的PDA培养基平板中，在25℃下培养7天。培养基覆盖菌丝体后，选择直径为1 cm的菌落并接种到100 ml PDA液体培养基中，并在25°C，100 rpm下培养7天。测试的桂花品种为正丹958。养基由混合土壤（营养土：ver石= 1：1）制成，并在高温下灭菌。择大小和大小相同的桂花种子，将其在70％的乙醇中浸泡30秒钟，然后用3％的次氯酸钠消毒表面3分钟，然后用用无菌水冲洗3次，然后将灭菌后的种子在培养的细菌溶液中浸泡12小时。消毒过的混合土壤以4：1的比例添加到自来水中，并在营养钵（高15厘米x直径12厘米）中混合。栽试验分为两组：普通浇水（每1天浇水20毫升）和干旱模拟（每1天浇水20毫升8％PEG-6000溶液）。
配置为接种20种内生真菌和缺失植物。行21种细菌控制处理，重复3次，将3个桂花种子浸入每个罐中。27°C，16 L / 8D的光周期和50％的相对湿度的温室中生长。种后4天，记录桂花幼苗的出现.10天后，确定植物的高度，不同处理条件下桂花的根长和鲜重。向方差分析用于测试在不同处理下的根长，植物高度和地上生物量的显着差异，并使用LSD方法进行了几次比较。
用SPSS 16.0统计软件进行数据分析。图1中可以看出，接种不同的内生真菌对桂花的发芽率有重要影响。大多数处理中，桂花的发芽率都超过80％。中，NY15和YC1接种的发芽率最高，达到100％，JZ7和JN16接种的发芽率也超过90％。DG50，DG25，JN-MG16，LQ2和TA-MG11的发芽率小于80％，其中JN-MG16和TA-MG11是两种小麦衍生的内生真菌，LQ2和TA-MG11的发芽率MG11是最低的。是50％。为正常浇水和干旱处理的一部分，接种不同的内生真菌对桂花植物的株高有显着影响（图2）。正常浇水条件下，用LW29，NY15，JN-MY1，JN16，YC1和Gx5接种的桂花植株的高度要高于未接种的对照。干旱胁迫下，用LW29，NY15，JN16和YC1接种的桂花植株的高度。内生真菌JN-MY1和Gx5接种的桂花苗略低于未接种的对照。正常的水分胁迫和干旱条件下接种其他菌株的桂花植株的高度小于未接种的对照。正常浇水条件下，大多数菌株有益于桂花的根部延伸，包括两个木霉属。霉菌衍生自小麦JN-MG16和JN-MY1（图3）。干旱胁迫下，仅用内生真菌JN16，LW29，QH6，JN-MY1，YC1，NY15和JN8接种的桂花植株的根长比未接种的对照长。常浇水和干旱胁迫下，内生真菌HM1，JN2，TA-MG11，HM2，LQ2，JZ7，DG50，DG25和DG40接种的桂花幼苗比未接种的对照短。图4中可以看出，接种了不同内生真菌的土壤上方的桂花幼苗的鲜重差异显着。正常的水分胁迫和干旱条件下，用NY15，LW29，YC1和JN16的内生真菌接种的桂花幼苗的地上重量高于没有对照的植物。在正常浇水条件下，接种JN-MY1内生真菌的桂花幼苗空中新鲜的新鲜重量大于未接种的对照。旱。了用Gx5和QH6菌株接种的桂花植株外，差异无显着性，并且用其他内生真菌接种的桂花植株的鲜重显着低于未接种对照的桂花植株。常浇水和干旱胁迫。旱作为一种非生物胁迫，对作物生长和产量产生不利影响。生真菌作为植物中的一种共生体，在促进植物生长，提高植物对病虫害的抗性以及对逆境的抗性中起着重要的作用[15]。究表明，在一定条件下正常干旱和干旱条件下接种不同种内生真菌的桂花幼苗的生长发育是不同的。一属的不同起源对桂花的生长发育也有不同的影响。表明不同的生态内生真菌对植物的作用不同，这与真菌本身的特性有关。兰科植物中分离出的五种内生镰刀菌真菌，其中之一具有与赤霉素ggs2和cps / ks的合成相关的基因，可以促进植物生长[16]。盐胁迫环境下，从盐渍土和非盐渍土中接种两种丛枝菌根真菌Glomus mosseae M1和M2对棉花的生长状况具有不同的促进作用[17]。时，我们可以看到，PEG模拟的干旱处理可以部分促进桂花幼苗的生长，当它们对低渗胁迫作出响应时，可以对植物胁迫做出响应[18]。常，桂花的内生真菌对桂花种子的发芽率没有明显影响，除了LQ2（Alternaria sp。这可能是与植物共生的LQ2。花是桂花生长发育的起点，当桂花达到一定阶段时，它利用病原菌来危害植物[19]。而，在用小麦桂花种子接种了小麦组织的三个内生真菌后，其中两个JN-MG16和TA-MG11显着降低了桂花的发芽率。因可能是植物内生菌与不同的宿主相容，其能力不同，桂花树价格选择宿主也有一定的特异性[20]。正常的浇水和干旱胁迫下，桂花幼苗中接种了枝孢属，毛壳菌属和白僵菌的内生真菌均优于其他内生菌，表明这三种内生菌起源于桂皮幼苗。花植物的抗旱性。与以前的研究相似。AS1221和青霉sp。
AS1618优于链格孢菌。AS1113和Colletotrichum sp。AS1716用于提高桂花植物的抗旱性。格孢作为桂花的主要内生真菌，已被证明可以提高桂花对病原菌的抗性，同时可以产生纤维素酶和其他相关酶，从而降解桂花的茎[ 22。SRD与链格孢属提取物一起添加可以在不同程度的干旱胁迫下促进桂花种子的发芽，从而提高桂花的抗旱性[23]。们以前的研究表明，Gx5（Alternaria sp。可以在正常的浇水环境中促进桂花的生长，并且对桂花具有更高的防治效果。这项研究中，还发现Gx5在正常的浇水环境中可以促进桂花幼苗的生长；但是，在干旱胁迫下，其生长促进作用并不明显，及其对不同环境下桂花幼苗的影响增长和发展的影响需要进一步研究。
霉木霉可以通过增加植物中次生代谢产物和脯氨酸的含量来提高植物的抗旱性[24]。本研究中，源自小麦的木霉属JN-MY1对桂花植物具有一定的促进作用，但不如NY15，LW29，YC1和JN16明显。常浇水和干旱条件下桂花生长的综合指标。生真菌桂花NY15，LW29，YC1和JN16对桂花植物具有明显的促进作用，可以提高桂花植物的抗旱性，具有很大的发展潜力。下文中，我们将进一步探索内生真菌培养条件的优化，接种方法的选择以及与桂花的相互作用机理。
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]，促进植物生长[5]，提高植物抗逆性[6，7]。旱是限制作物生长的主要因素之一，严重影响作物的新陈代谢和单产。生真菌可以促进宿主植物在恶劣环境中的存活，与植物相互作用后，可以提高植物对非生物胁迫的耐受性，特别是抗旱性。究表明，内生真菌可以通过影响植物的形态发育以及对胁迫的生理和生化反应来诱导对宿主干燥的抗性[8]。
生真菌还可以通过产生生长素来提高植物对干旱胁迫的反应能力，同时抑制钠离子的吸收或阻止其迁移[10]。盐胁迫和干旱条件下，内生真菌通过促进植物吸收钾和钙等营养物质并促进营养平衡来提高宿主植物的耐受性[11]。花是中国播种面积最大，单产最高的作物，在确保国家粮食安全中发挥着重要作用[12]。旱是影响桂花产量的主要因素之一，特别是对桂花期的影响更为严重，会导致苗木生长缓慢，成活率低，导致不同程度的减产，在严重的情况下可能会导致灭绝[13]。
往的研究主要集中在桂花的抗旱机理和抗旱品种的选择上。生真菌的使用为提高桂花的抗旱性提供了新思路。本研究中，选择了从桂花和小麦组织中分离的20种内生真菌接种桂花植物，并使用8％PEG-6000模拟干旱胁迫。析了正常水分和干旱胁迫下桂花植株生长的差异，滤出内生真菌，可以提高桂花的抗旱性，为发展提供重要的微生物资源。及内生真菌在农业生产中的用途。桂花叶片，根和小麦叶片中分离出内生真菌，共计20个菌株，具体名称和来源列于表1。择合适的菌株并接种在9厘米的PDA培养基平板中，在25℃下培养7天。培养基覆盖菌丝体后，选择直径为1 cm的菌落并接种到100 ml PDA液体培养基中，并在25°C，100 rpm下培养7天。测试的桂花品种为正丹958。养基由混合土壤（营养土：ver石= 1：1）制成，并在高温下灭菌。择大小和大小相同的桂花种子，将其在70％的乙醇中浸泡30秒钟，然后用3％的次氯酸钠消毒表面3分钟，然后用用无菌水冲洗3次，然后将灭菌后的种子在培养的细菌溶液中浸泡12小时。消毒过的混合土壤以4：1的比例添加到自来水中，并在营养钵（高15厘米x直径12厘米）中混合。栽试验分为两组：普通浇水（每1天浇水20毫升）和干旱模拟（每1天浇水20毫升8％PEG-6000溶液）。
配置为接种20种内生真菌和缺失植物。行21种细菌控制处理，重复3次，将3个桂花种子浸入每个罐中。27°C，16 L / 8D的光周期和50％的相对湿度的温室中生长。种后4天，记录桂花幼苗的出现.10天后，确定植物的高度，不同处理条件下桂花的根长和鲜重。向方差分析用于测试在不同处理下的根长，植物高度和地上生物量的显着差异，并使用LSD方法进行了几次比较。
用SPSS 16.0统计软件进行数据分析。图1中可以看出，接种不同的内生真菌对桂花的发芽率有重要影响。大多数处理中，桂花的发芽率都超过80％。中，NY15和YC1接种的发芽率最高，达到100％，JZ7和JN16接种的发芽率也超过90％。DG50，DG25，JN-MG16，LQ2和TA-MG11的发芽率小于80％，其中JN-MG16和TA-MG11是两种小麦衍生的内生真菌，LQ2和TA-MG11的发芽率MG11是最低的。是50％。为正常浇水和干旱处理的一部分，接种不同的内生真菌对桂花植物的株高有显着影响（图2）。正常浇水条件下，用LW29，NY15，JN-MY1，JN16，YC1和Gx5接种的桂花植株的高度要高于未接种的对照。干旱胁迫下，用LW29，NY15，JN16和YC1接种的桂花植株的高度。内生真菌JN-MY1和Gx5接种的桂花苗略低于未接种的对照。正常的水分胁迫和干旱条件下接种其他菌株的桂花植株的高度小于未接种的对照。正常浇水条件下，大多数菌株有益于桂花的根部延伸，包括两个木霉属。霉菌衍生自小麦JN-MG16和JN-MY1（图3）。干旱胁迫下，仅用内生真菌JN16，LW29，QH6，JN-MY1，YC1，NY15和JN8接种的桂花植株的根长比未接种的对照长。常浇水和干旱胁迫下，内生真菌HM1，JN2，TA-MG11，HM2，LQ2，JZ7，DG50，DG25和DG40接种的桂花幼苗比未接种的对照短。图4中可以看出，接种了不同内生真菌的土壤上方的桂花幼苗的鲜重差异显着。正常的水分胁迫和干旱条件下，用NY15，LW29，YC1和JN16的内生真菌接种的桂花幼苗的地上重量高于没有对照的植物。在正常浇水条件下，接种JN-MY1内生真菌的桂花幼苗空中新鲜的新鲜重量大于未接种的对照。旱。了用Gx5和QH6菌株接种的桂花植株外，差异无显着性，并且用其他内生真菌接种的桂花植株的鲜重显着低于未接种对照的桂花植株。常浇水和干旱胁迫。旱作为一种非生物胁迫，对作物生长和产量产生不利影响。生真菌作为植物中的一种共生体，在促进植物生长，提高植物对病虫害的抗性以及对逆境的抗性中起着重要的作用[15]。究表明，在一定条件下正常干旱和干旱条件下接种不同种内生真菌的桂花幼苗的生长发育是不同的。一属的不同起源对桂花的生长发育也有不同的影响。表明不同的生态内生真菌对植物的作用不同，这与真菌本身的特性有关。兰科植物中分离出的五种内生镰刀菌真菌，其中之一具有与赤霉素ggs2和cps / ks的合成相关的基因，可以促进植物生长[16]。盐胁迫环境下，从盐渍土和非盐渍土中接种两种丛枝菌根真菌Glomus mosseae M1和M2对棉花的生长状况具有不同的促进作用[17]。时，我们可以看到，PEG模拟的干旱处理可以部分促进桂花幼苗的生长，当它们对低渗胁迫作出响应时，可以对植物胁迫做出响应[18]。常，桂花的内生真菌对桂花种子的发芽率没有明显影响，除了LQ2（Alternaria sp。这可能是与植物共生的LQ2。花是桂花生长发育的起点，当桂花达到一定阶段时，它利用病原菌来危害植物[19]。而，在用小麦桂花种子接种了小麦组织的三个内生真菌后，其中两个JN-MG16和TA-MG11显着降低了桂花的发芽率。因可能是植物内生菌与不同的宿主相容，其能力不同，桂花树价格选择宿主也有一定的特异性[20]。正常的浇水和干旱胁迫下，桂花幼苗中接种了枝孢属，毛壳菌属和白僵菌的内生真菌均优于其他内生菌，表明这三种内生菌起源于桂皮幼苗。花植物的抗旱性。与以前的研究相似。AS1221和青霉sp。
AS1618优于链格孢菌。AS1113和Colletotrichum sp。AS1716用于提高桂花植物的抗旱性。格孢作为桂花的主要内生真菌，已被证明可以提高桂花对病原菌的抗性，同时可以产生纤维素酶和其他相关酶，从而降解桂花的茎[ 22。SRD与链格孢属提取物一起添加可以在不同程度的干旱胁迫下促进桂花种子的发芽，从而提高桂花的抗旱性[23]。们以前的研究表明，Gx5（Alternaria sp。可以在正常的浇水环境中促进桂花的生长，并且对桂花具有更高的防治效果。这项研究中，还发现Gx5在正常的浇水环境中可以促进桂花幼苗的生长；但是，在干旱胁迫下，其生长促进作用并不明显，及其对不同环境下桂花幼苗的影响增长和发展的影响需要进一步研究。
霉木霉可以通过增加植物中次生代谢产物和脯氨酸的含量来提高植物的抗旱性[24]。本研究中，源自小麦的木霉属JN-MY1对桂花植物具有一定的促进作用，但不如NY15，LW29，YC1和JN16明显。常浇水和干旱条件下桂花生长的综合指标。生真菌桂花NY15，LW29，YC1和JN16对桂花植物具有明显的促进作用，可以提高桂花植物的抗旱性，具有很大的发展潜力。下文中，我们将进一步探索内生真菌培养条件的优化，接种方法的选择以及与桂花的相互作用机理。
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