大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳影响因素的研究

　　电泳技术是分子标记辅助选择技术的关键步骤。施有效的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术体系可以提高分子标记辅助选择技术的效率。桂花为试验材料，以凝胶化速度和凝胶带的锋利度为测定标准，分别测定电泳中的凝胶浓度，温度和凝结率。索。果表明，凝胶浓度，温度和促凝剂比例均与凝胶聚合时间呈负相关，但四种常用凝胶浓度的凝胶时间无明显差异。
　　以主要根据目标产物的大小来选择浓度。凝胶质量而言，凝结剂的温度和比例与凝胶的脆性呈负相关。
　　面分析表明，工作温度为25〜35℃，混凝比为1:10。合速度适中，条带清晰，检测效果最佳。
　　助项目：关于年轻研究人员创新的研究和经验项目（，201913）；建立天津农业产业技术体系创新团队（ITTVRS）的特殊项目。于作者张宏（1990-），女人，天津，研究实习生，硕士，从事桂花分子选择研究。讯作者，副研究员，从事十字花科蔬菜的育种。着分子生物学和计算机科学的飞速发展，分子标记辅助选择（MAS）随着时间的流逝而出现，弥补了传统选择周期长和经验选择的缺点。不仅大大缩短了新品种的选择。择过程，减少了选择过程中的工作量，并确保了在遗传水平上筛选的准确性。

　　技术已广泛用于水稻[1]，小麦[2]，桂花[3]和甜椒[4]和其他经济作物和农作物。分子标记辅助下选择过程的关键步骤是检测PCR扩增产物。

　　于操作员来说，掌握适当的检测技术很重要。前，实验室中常用的检测方法是琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。脂糖凝胶的操作过程较简单，对初学者来说更容易掌握，但适用于200 bp至近50 bp的长度。于kb DNA，检测小片段的分辨率DNA不好；聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于高通量样品的检测，并且对于分离5至500 bp的DNA具有更好的效果和更好的分辨率。列建等。[5]认为在准等基因系的分析中，SSR标记比RAPD标记更具优势。于SSR型分子标记，非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以有效检测单拷贝差异，因此在实际应用中检测方法具有较高的选择率。
　　而，其操作过程相对繁琐，并且影响橡胶的制造，操作和染色过程的成败的因素也很复杂。国的相关研究主要集中在改进染色方法上[6]。
　　乏相对的关注使刚进入实验室的研究人员很难自己掌握规则。胶的质量是最好的。胶的浓度，操作环境的温度和凝结剂的比例都会影响凝胶的聚合速率和检测效果。凝胶的聚合速度和检测效果开始，该测试深入研究了三个主要因素的影响[14-15]，发现凝胶浓度对凝胶的影响很小。合时间，但它决定了分子筛的孔径。响目标产品的通过，从而影响检测效果。一方面，凝胶制造过程中促凝剂的温度和比例对聚合速率和检测效果有明显的影响。于不连续的实验室使用，桂花树价格建议选择25〜35℃的测试条件，APS：TEMED比为1:10。胶聚合时间为约8分钟，这不仅可以有效地缩短凝胶制备时间，而且对带的展开具有明显的作用。
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